植物亚细胞定位技术服务择优「迈斯普」

亚细胞定位技术服务实验流程：

构建载体——测序验证成功后转大肠——扩增大肠——获得大量载体——pcr——构建表达载体——转化农、注射/转化拟南芥/原生质体——取样品共-观察。

亚细胞定技术位服务实验注意点：

1、有共定位要求的蛋白，客户提供蛋白定位预测结果，我们选择相应的marker载体进行共定位。如果观察结果和预测不一致，则应该是蛋白原因而不是观察原因。如果需要二次观察则另外收取样品观察费用。

2、实验结果：提供清晰的荧光图，明场图，merge图。

3、交付数据：数据图、质粒测序结果、质粒及大肠。

4、提供拟南芥、水稻、等原生质体。

5、marker种类：线粒体、叶绿体、细胞核定位、细胞膜定位、内质网

6、可以在实验后保留瞬时转染的叶片供后续检测。

注意事项

除前面过程中附加的注意事项以外，还需注意：

1、操作玻片的过程中要小心，以免玻片碎裂；

2、处理好的玻片立即照相，时间长了细胞容易干掉导致形态发生改变；

3、摄取照片时，紫外照射时间尽量短以免荧光淬灭；

4、实验完毕后清理实验台面，将载玻片清洗后用75%酒精浸泡，以备回收使用。

研究者首先通过荧光成像技术来定义细胞器和亚细胞区的蛋白质组信息。通过测定30个亚细胞结构的蛋白定位，在细胞图谱中定义了13个亚细胞蛋白质组以及分泌蛋白质的蛋白质组，通过荧光显微镜在细胞图谱中注释的亚细胞结构。研究人员以蛋白质图谱中的蛋白空间信息对蛋白的互作关系进行验证图5。结果表明，在质膜上的蛋白拥有更多的机会与质膜、高尔基体、囊泡、黏着斑、细胞接头及细胞溶质中的蛋白发生直接的互作关系。

1，3-二磷酸甘油酸转变成3-磷酸甘油酸时产生一分子atp。磷酸烯醇型酸转变成酸时又产生1分子atp，此反应由酸激酶催化。酸接收酵解过程产生的1对氢而被还原成乳酸。乳酸是糖酵解的终产物。这种亚细胞地图能用于改进现有的蛋白质-蛋白质相互作用网络，也是解析人类细胞高度复杂结构的重要资源。 2．关键酶 糖酵解途径中大多数反应是可逆的，但有3个反应基本上不可逆，分别由己糖激酶(或---激酶)，6-磷酸果糖激酶-1和酸激酶催化，是糖酵解途径流量的3个调节点，所以被称为关键酶。在体内，关键酶的活性受到代谢物(包括atp，adp)和(如---和胰素)等的周密调控。 3．生理意义 糖酵解的生理意义在于迅速提供能量尤其对肌肉收缩更为重要。此外，红细胞没有线粒体，完全依赖糖酵解供应能量。神经、白细胞、等代谢---活跃，即使不缺氧也常有糖酵解提供部分能量。