酵母双杂交技术服务来电咨询「多图」
简称原位杂交,in situ hybridization histochemistry;ishh属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测-杂交,再应用标记物相关的检测系统,在-原有的位置将其显示出来的一种检测技术。原位杂交的本质就是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的-复性结合而使得组织细胞中的特--得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在-的原有位置上显示出来。做基因染色体定位或染色体杂交分析,基因组原位杂交时检测是否有外源染色体或染色体片段,动物细胞需要制备分裂间期,中期的细胞。
武汉迈斯普生物科技有限公司是一家从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷,由3位归国博士创办。但是,选择我们,您只需要提供样品及基因信息,即可快得到原位杂交的结果及-实验服务。公-期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色,依托光谷生物城技术产业优势,面向全国提供的生物技术服务。
网上有很多关于fish的实验步骤教程,但每个探针盒子的操作可能存在差异。懂了原理,才能以不变应万变。
fish的大致步骤分为探针变性、标本变性、杂交、洗脱、杂交信号放大(适用于适用生物素标记的探针)、复染、封片、荧光显微镜观察fish结果。
石蜡切片的fish要点
1组织固定,采用ph7.2的10%甲醛固定24h是比较适合的,ph很重要。较厚的组织块建议切开后再固定。这一点小编已经反复提过很多次了。-的固定是所有病理实验的前提。
2对于石蜡切片来说,采用蛋白酶k作为-液是-的选择。-条件20g/l蛋白酶k在50℃下-20min。胃蛋白酶是极易失活的,失活了就没法充分-,-过度又会使细胞核变模糊。综合来看,小编更蛋白酶k。
3石蜡切片的杂交温度一般都是37摄氏度。而杂交时间则需要摸索才能得到-时间。不过,一般的过夜孵育基本可以达到目的。
4fish实验中非特-着色是个难以避免的问题,我们能做的就是尽量减少背景。具体可作为的地方:充分严格漂洗、全程避免干片、探针浓度不宜太高、杂交温度要控制在37℃。
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