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使用液相色谱时，堵、漏是常见的问题，这些问题大多是由于使用不当或不够重视所致。液体泄漏问题较易发现和解决。液体泄漏原因概述如下：1、接头处没有紧固。2、连接处易损耗材变形或老化，为避免不-的麻烦，需及时更换耗材，以免出现管线漏液或崩开也可能是peek头在柱子里断了。3、管件磨损-导致漏液，如柱塞密封、进样阀转子密封等。躲藏坑：防堵堵漏是一对孪生姐妹，常常相伴出现，说完我们再来看看堵漏的问题。

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hplc是从-的液相色谱方法发展而来，它以液体为流动相，并且采用了微粒细粒固定相的柱层析分离技术。它的分离机理与普通的柱色谱一样，但填料更精细，需要高压泵推动，柱效高，分析速度快。在液相色谱中，流动相也参与了组分的分离过程，其组成、比例和 ph值可以灵活调整，分离方式多样。实践中，对不同样品进行分离，主要是通过改变流动相组成来调节样品在色谱柱的保留程度和选择性。hplc技术自上世纪60年代出现以来，由于采用了高压输液泵、全多孔微粒填充柱和高灵敏度检测器，实现了对样品快速、、灵敏的分离检测。hplc技术的引入，使 hplc吸收了-液相色谱的发展经验，大大提高了仪器的自动化水平和分析精度。目前采用微处理器控制的 hplc系统，不仅自动化程度高，而且可以控制仪器的操作参数(如溶剂梯度洗脱、流动相流量、柱温、自动进样、洗脱液收集、检测器功能等)，同时还可以缩放、叠加得到的色谱图，并对保留的数据和峰高、峰面积进行处理等，为色谱分析-提供、全功能的分析工具。

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根据分离机制的不同，液相色谱可以分为：水相固吸附色谱水液分布色谱法水离子交换色谱——离子对色谱分子量排阻色谱(或凝胶渗透色谱)i)固吸附色谱流体为液体，固定相为固体吸附剂，物质按吸附量的不同而进行分离。㈡液-液分配色谱法移动相和固定相都是液体的色谱法，即液-液色谱，是利用样品组分在两种不相溶的液相之间的分布进行分离。一个液相是一个流动相，另一个是在载体上施加固定相。流相极性小于固定相极性的液-液色谱方法称为正相分配色谱。流相极性大于固定相极性的液-液色谱称为反相分配色谱。㈢离子交换色谱法㈣离子对色谱法。

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分子排阻色谱法移动相就像人体的-一样，其直接影响着整个系统的正常运行。应采用 hplc级溶剂，溶剂之间不可混溶，不可直接更换！异作为过渡溶剂，通常在换溶剂时，水相和与其不溶于水。留意溶剂的截止波长。截断波长是指这种溶剂在紫外检测器中使用的低波长，在低于此波长时，溶剂会有-的紫外吸收，从而影响-的稳定性，干扰对被分析物质的检测。hplc所用的水必须是新鲜的，并经过0.45微米的滤膜过滤。每天换新鲜水。长时间不使用时，要用替换使用水管道，防止霉变。保持色谱柱和系统，使用完仪器后，应采用适当的溶剂清洗等方法。若要用缓冲盐，首先要把盐洗干净。如果仪器长时间不使用，建议封存纯。由于倾向于生成聚合物。封存、/水或/水。如果发生流路堵塞，可试着反接后进行冲洗。藻类在被污染的溶剂或溶剂瓶中生长，会缩短溶剂过滤器的寿命，并影响泵及系统的性能。水溶剂或磷酸盐缓冲液(ph 4-7)尤其如此。

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人生不可能如你所想的那么好，但也不会像你想的那样糟糕。感觉人的脆弱和坚强都超出了自己的-。04进样针擦洗：进液样时要注意这一点，当进样针吸取液体样品时，进样针的针尖部位会残留少量液体样品，为了使每次进样量保持一致，我们需要用滤纸往进样针头轻轻一靠，进样针的进样针位置会残留少量液体样品。及时更换进样口隔垫：气体手动进样时，由于进样口隔垫较粗，进样多次样品后，隔垫的密封不严，会有微微漏气的情况发生，继续做样品会造成隔垫漏气，因为进样口隔垫比较粗。

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进样针应用：当使用10 ul、25 ul的微量小体积进样针时，由于进样针尖和推杆较细，稍不小心就会弄弯，然后针就废了。所以进样时，需用手扶住针尖，垂直扎入进样嘴，手指从上向下垂直动金属活塞进样针，快速注入样品，然后快速拔下进样针。07进样针取样赶气泡：用进样针抽取液体样品时，进样针内部会出现小气泡，这些气泡会影响取样体积，终影响样品的重复性。所以取样时需将针头内的气泡驱除，可将进样针头插入2 ml进样瓶中，以移除大体积(大于取样体积)，因为进样针的隔垫密封性较好，虽然进样针插入隔垫内但将进样针倒置不会漏液，进样针倒置不会漏液，这是由于进样针插到隔垫内但将进样针放入样品体积刻度处即可。