腺-载体系统在线咨询「在线咨询」

腺---呈无囊膜的球形结构,其---粒子在感1染的细胞核内常呈晶格状排列,每个---颗粒包含一个36 kb的线性双链dna,两端各有一个100~600 bp的反向末端重复序列(inverted terminal re-pea,t itr), itr的内侧为---包装信号,是---包装所需要的顺式作用元件。基因组包含早期表达的与腺---copy相关的e1~e4基因和晚期表达的与腺---颗粒组装相关的l1~l5基因。

线状双股dna与---蛋白形成直径为60~65 nm的髓芯,被包裹于衣壳内。衣壳呈二十面体对称,由252个直径8~10 nm的壳粒组成,壳粒排列在三角形的面上,每边6个,其中240个为六邻体(非顶点壳粒) ,另12个为五邻体基底(顶点壳粒)。每个六邻体是六邻体蛋白的同源三聚体,三聚体的六邻体分子有一个三角形的塔尖和五面体的基底,塔区由4个环构成即loop1、loop2、loop3、loop4,基底包含两个区域p1、p2区[3]。六邻体上的表位(epitope)是诊断不同血1清型的标准,它包括哺乳动物腺---属的抗原成分,是---体对免1疫选择压力zui敏感的部位。

每个五邻体基底上结合着1根(哺乳动物腺---)或2根(禽腺---)长9~77. 5 nm的纤维突起,这些纤维以五邻体蛋白为基底由衣壳面伸出,纤维顶端形成头节区,纤突有血1清特---,且含有负责体外血细胞凝集的种属特---抗原决定位点。

基因导入细胞常用方法

不同的载体在不同的宿主细胞中繁殖，导入细胞的方法也不相同。

由于外源dna的进入而使细胞遗传性改变称为转化，早在1943年，avery等就发现有毒肺1炎双球菌的dna与---肺1炎双球菌共培养后产生有毒性的肺1炎双球菌后代的转化现象。但dna进入细胞的效率很低，在分子生物学和基因工程工作中可采取一些方法处理细胞，经处理后的细胞就容易接受外界dna，称为感受态细胞，再与外源dna接触，就能提高转化效率。例如大肠杆1菌经冰冷cacl2的处理，就成为感受态---，当加入重组质粒并突然由4℃转入42℃作短时间处理，质粒dna就能进入---；用高电压脉冲短暂作用于---也能---提高转化效率，这称为电穿孔electroporation转化法

启动子：rna聚合酶特---识别结合和启动转录的dna序列。有方向性，位于转录起始位点上游。上游启动子元件：tata盒上游的一些特定dna序列，反式作用因子可与这些元件结合，调控基因的转录效率。反应元件：与被的信息分子受体结合，并能调控基因表达的特异dna序列。增强子：与反式作用因子结合，增强转录活性，在基因任意位置都有效，无方向性。沉默子：基因表达负调控元件，与反式作用因子结合，抑制转录活性。poly(a)加尾信号：结构基因末端保守的aauaaa顺序及下游gt或t富含区，被多聚腺苷酸化特异因子识别，在mrna 3′端加约200个a。2反式作用因子：能识别和结合特定的顺式作用元件,并影响基因转录的一类蛋白质或rna。