登录后台
原位杂交试剂电话「思特进」
发布者：武汉思特进科技发展有限公司 时间：2021-11-13
多彩色荧光原位杂交技术多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization，mfish)是在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术，它用几种不同颜色的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交，能同时检测多个靶位，各靶位在荧光显微镜下和照片上的颜色不同，呈现多种色彩，因而被称为多彩色荧光原位杂交。它克服了fish技术的局限，能同时检测多个基因，在检测遗传物质的突变和染色体上基因定位等方面得到了广泛的应用(杨明杰等1998)。
另一种多聚体促进剂是聚丙0烯0酸，用其钠盐，浓度为2%～4%。与---葡聚糖相比，其优点是价格低廉，粘度低mw=90 000。小分子化学试剂酚和guandine thiocyanate也能促进杂交，它们可能是通过增加水的疏水性和降低双链和单链dna间的能量差异而发挥作用。酚作为杂交促进剂，只能在低dna浓度的液相杂交中观察到，该方法曾被称为酚乳化复性技术，该法不能用于固相杂交，因酚可引起-与膜的非特异吸附作用，即使在液相杂交中的应用也是有限的。而guandine thiocyanate可通过降低双链dna的tm值而起作用。此外，该分子还可以促进rna的杂交，有裂解细胞而抑制rnase的作用。总之，---葡聚糖和---因能用于固相杂交是目前zui常用的杂交促进剂。
总的来说，随探针浓度增加，杂交率也增加。另外，在较窄的范围内，随探针浓度增加，敏感性增加。依我们的经验，要获得较满意的敏感性，膜杂交中32p标记探针与非放0射性标记探针的用量分别为5～10 ng/ml和25～1000ng/ml，而原位杂交中，无论应用何种标记探针，其用量均为0.5～5.0μg/ml。探针的任何内在物理特性均不影响其使用浓度，但受不同类型标记物的固相支持物的非特异结合特性的影响。
根据不同的杂交实验要求，应选择不同的-探针。在大多数情况下，可以选择克0隆的dna或cdna双链探针。但是在有些情况下，必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和rna探针。例如，在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针，在检测单链靶序列时应选用与其互补的dna单链探针通过克0隆人m13噬菌体dna获得或rna探针，寡核苷酸探针也可。长的双链dna探针特---较强，适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体 ，但不适宜于组织原位杂交，因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下，寡核苷酸探针和短的pcr标记探针80～150bp具有较大的---性。
联系时请说明是在云商网上看到的此信息，谢谢！
本页网址：https://www.ynshangji.com/xw/23209227.html
声明提示：
本页信息（文字、图片等资源）由用户自行发布,若侵犯您的权益请及时联系我们，我们将迅速对信息进行核实处理。
