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低温生物菌种——筛选模型

根据不同的筛选目的，采用不同的筛选模型。如常规筛选产生菌的方法是将土壤中分离所得的纯种，在含有琼脂培养基的平皿上培养后，用打孔器将菌块移至含有试验菌的琼脂培养基上，在适宜的温度下培养一定时间后取出，如在菌块的周围有透明的---圈，则表明此菌种具有产生抑制试验菌生长的---物质的能力。所得菌种经过摇瓶液体发酵，选出生产能力高的菌种。另一方面对所提取的进行结构分析、药理试验及---试验等，确为有效者，即可作为生产菌种。又如筛选脂肪酶生产菌种的方法是将分离所得的霉菌涂布于含有牛脂的琼脂培养基上，恒温培养一定时间，如菌落周围出现透明圈的，则该菌具有分解脂肪的能力，进一步作摇瓶发酵测定酶活力，挑选产量高者作生产菌种的出发菌株。

低温生物菌种的改良

改良

即采用遗传育种的方法，使菌株(从自然界分离筛选而得的出发菌株)的遗传因子 dna发生突变、重组，从而从中选出产量高、成品---或具有新的培养特性如耐产物抑制、能利用廉价原料以及具有生产新品种能力的优良菌种。采用的方法有诱变育种、杂交育种、细胞融合技术和重组dna技术。诱变育种是利用诱变因子如紫外线、钴－60、乙烯胺类等物理或化学诱变剂处理生产菌株的单孢子悬浮液，以获得诱发突变株。随后进行突变株的筛选，从中筛选高产菌株。由于随机的突变群体中，有益突变所占比例很低，要获得高产突变株必须进行大量筛选。可根据生物合成途径中的反应点,并通过它们的改变以提高产率或其他特性，如选育抗产物反馈抑制的突变株、增加细胞透性的突变株及营养缺陷型的突变株等。这种“理性筛选法”广泛应用于---酸产生菌的选育。

低温生物菌种的工艺介绍

现有生化工艺有活性污泥法、生物接触氧化、mbbr、mbr等，这些工艺在常温下均可实现氨氮的有效去除并达标，这时好氧系统中占------的是中温微生物硝化菌，硝化菌分自养硝化---和异样硝化菌。

自养硝化菌生长繁殖缓慢，在活性污泥系统中无法与异养---竞争，难以维持较高的细胞浓度，需要保持较长的污泥停留时间来取得较好的脱氮效果，易受外界环境影响，对环境冲击尤其是毒物冲击非常敏感，硝化系统很容易崩溃，要经常不断的驯化和培养。

低温生物菌种——常用菌种介绍

侧孢芽孢菌

在---期， 短芽孢菌为革兰氏染色阴性，菌体呈细长的杆状；在对数生长期，为革兰氏染色阳性，菌体成短而粗的杆状；在静止期，革兰氏染色又转为阴性，菌体成细长的杆状，偶尔也能观察到椭圆形的芽孢。图1是50号菌用1%h2so4(ph6.8)负染后的电镜照片：菌体杆状、周生鞭毛、大小约0.88μm×2.2μm。

作为非脊椎动物的病原菌，有关研究人员曾---了这种---的杀线虫能力，由于所---的这些侧孢短芽孢菌菌株都不产生伴孢晶体，所以这些菌株的杀线虫毒力因子并非来自于具有特征性的伴孢晶体。然而，smirnova ta，et al.分离到了2株能形成大的伴孢晶体的侧孢短芽孢菌菌株，这两株菌显示出很强的杀昆虫能力，研究证实，这种能力与菌体在形成芽孢过程中的伴孢晶体相关。有趣的是，singer的实验表明，一株侧孢短芽孢菌的杀线活性源于一个热稳定蛋白的毒性。所有这些研究表明，不同侧孢短芽孢菌菌株拥有不同的线虫致病因子。牛秋红研究小组分离到的侧孢短芽孢菌g4菌株具有---的杀线虫功能，但其并不产生伴孢晶体。从该菌株的发酵液里提取的粗蛋白酶液在12h内能杀掉所有测试线虫并在24h内完全降解。从侧孢短芽孢菌g4菌株中纯化出的丝氨酸胞外蛋白酶可水解多种底物，包括胶原和线虫体壁，具有很强的杀线虫能力，组织病理电镜实验证实这种蛋白酶---破坏了线虫体壁。而且，蛋白酶将线虫体壁分解成为一些---酸或小肽，这些营养物使病原------的生长繁殖。该蛋白酶基因异源表达的菌株表现出了明显的杀线虫活性，重组蛋白酶在体外对线虫体壁降解，而蛋白酶缺失菌株丧失了大部分的杀线活性，死的线虫在生测中保持了完整的体壁，表明蛋白酶在线虫侵染中起主要作用。