IP-WB活性检测试剂盒优惠报价「武汉纽斯特」

武汉纽斯特生物科技有限公司wuhanneweastbiotechonologyco.ltd，系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在中国的子公司。美国neweastbio-于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等。

悬浮细胞

1.培养细胞并根据需要用活化剂或抑制l剂-。

2.进行细胞计数，然后通过离心沉淀细胞。

3.吸出培养基，并用冰冷的pbs洗涤两次。

4.完全除去pbs洗涤液，然后向细胞沉淀中加入冰冷的1x分析/裂解缓冲液

   每1 x 107池0.5 – 1 ml。

5.通过重复移液裂解细胞。

6.将裂解物转移至适当大小的试管中，并置于冰上。

7.如果发生核裂解，则细胞裂解液可能变得非常粘稠，难以移液。如果这

   发生时，裂解液可通过27?号注射l器针头3-4次以剪切

   基因组dna。

8.通过离心10分钟在4°c下为12,000 x g清除裂解物。

9.收集上清液并将样品保存在冰上以备立即使用，或速冻并保存在-

   70°c以备将来使用。

阳性和阴性对照的体外gtpγs/ gdp蛋白质上样量

    注意：体内-细胞会激l活大约10％的可用rab35，而

    体外gtpγs蛋白负载将激l活近90％的rab35。

1.将0.5 ml每种细胞提取物等分到两个微量离心管中或使用1 μg纯化的rab35蛋白。

2.向每个试管中加入20 μl 0.5 m edta至20 mm终浓度。

3.将5 μl 100 xgtpγs至100 μm，终浓度加到一个试管中阳性对照。

4.在第二个试管中加入5 μl 100 x gdp至1 mm，终浓度阴性对照。

5.在搅拌下将试管在30°c孵育30分钟。

6.通过将试管放在冰上并添加32.5 μl 1 m mgcl2至60 mm。

arl1激l活试验。纯化的gst标记的arl1蛋白用抗活性arl1单克l隆抗l体cat。#26924用gdp车道1或gtpγs车道2处理后，用抗arl1单克l隆抗l体cat进行印迹。#26056年。显示arl1蛋白输入控制在底部面板中。

产品描述

arf样蛋白1arl1是调节性gtpase家族中的一员，位于ras中gtpases的超家族，在真核生物中具有高度保守的同源基因。arl1-用于果蝇和秀丽隐杆线虫的早期胚胎发育。arl1在一级序列，细胞位置和功能膜交通的调节到arf1–6甚至共享几个共同的有约束力的合作伙伴。除了在膜交通中的作用高尔基/跨高尔基网络，有-表明arl1可能在离子稳态中起作用酵母。

目前还没有直接测定arl1-gtpase活性的方法。neweast biosciences arl1激l活检测试剂盒是基于特定构型的单克l隆抗l体特-识别arl1 gtp，但不识别arl1 gdp的抗l体。鉴于单克l隆抗l体对其抗原，活化试验可在短时间内进行。这个分析结果-，重现性一致。

一系列结构多样的配体，从光子到大肽，激l活gpcrs来激发它们的生理功能。配体结合的gpcrs，反过来，起到鸟呤核苷酸交换的作用gβγ存在下gα亚基上的gdp与gtp交换的催化因子，导致gα亚单位与gβγ二聚体分离形成两个功能单元gα和gβγ。gα和gβγ亚单位都向各种细胞信号通路发出信号。根据顺序与功能同源，g蛋白分为四个家族：gs，gi、gq和g12。增加这些g蛋白的效应器和相互作用蛋白的数量已经被鉴定，生理上g蛋白参与的过程正在增殖。