烟台丙磺酸SPE柱选择价格合理「硕谱生物」
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对正相体系,先对目标化合物的正-溶液进行上样,然后用5%、10%、20%、30%、40%、60%、70%、80%、90%和的正-溶液对目标化合物进行洗脱,分别收集洗脱液的分析结果,建立淋洗曲线,确定目标化合物洗脱后的溶剂体系,淋洗后的甲1基-1醚含量应略低于目标化合物恰好被洗脱时的溶剂体系,而洗脱液中甲1基-1醚的含量应略高于目标化合物正好被洗脱时的溶剂体系。
合理处理 spe柱,在 spe柱中,吸附剂可能存在少量干扰物,有效活化可避免干扰物进入洗脱液中,活化溶液应选择整个洗脱过程中洗脱强度zui高的溶剂体系。
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样本制备问题
大部分流速问题是由于样品制备不当造成的。例如样品混浊、离心过滤不充分造成上样时筛板堵塞,或样品本身的蛋白质等大分子物质处理不当,造成有效蛋白沉降,造成筛板堵塞。通过改进前处理方法,可解决由这种原因引起的流速问题。因此,样品准备是- spe正常流动速度的di一步。
小柱子本身因素(填充尺寸和柱子体积)
充填粒径的作用,大充填粒径的充填越疏松,流动相阻力越小,流速越快;小充填粒径的作用,充填越紧,流速越慢。这一现象在弗罗里硅土和硅藻土小柱中都很明显。小柱粒径范围一般为40-60 um,农残级弗罗里硅土的粒径范围为75-150 um,大柱粒径范围为600-900 um。因此弗罗里硅土和硅藻土小柱的流速会比一般小柱要快,-是大孔硅藻土小柱,在使用时需要配以导流针来控制流速。
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选用 spe柱规格的原则是,首先要- spe柱的填料具有足够的容量,以便将目标化合物100%保留在柱体上。另外,填料也不易过量。填充物越多,溶剂对目标化合物的洗脱效果就越好。
所以在选择 spe柱规格时,一定要考虑 spe柱的容量。柱容是指一单位的填料以主要力保持其。键合型硅胶柱容量一般为1%~5%。
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例如, spe柱的填料为100 mg,其大容量一般不超过5 mg。该离子交换剂柱容量约为0.5~1.5 meq/g。需要-的是,由于我们面对的是多种混合物,除了目标化混合物之外,还存在很多干扰。
因此,在选择柱状规格时,必须考虑到目标化合物及其在萃取条件下可能吸附的总数量,而不能只考虑目标化合物。另外,即使目标化合物未超过柱容量, spe柱在保留目标化合物的同时也保留了部分干扰物,由于两者的总量已超过柱容量,其结果必然是部分目标化合物无法保留在 spe柱中。所以为安全起见,建议柱容好比目标化合物估计含量高一倍。
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固相萃取简单的方法是手工操作,即在固相萃取柱的上端连接一个,通过挤压,将萃取柱中的液体排出萃取柱。也可采用正、负压固相萃取装置对批量样品进行固相萃取。随著科学技术的发展,样品数量不断增加,越来越多的分析实验室开始采用自动固相萃取仪器,尤其是采用多通道固相萃取仪器处理批量样品。
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固体萃取柱通用工艺:
固相萃取简单的方法是手工操作,即在固相萃取柱的上端连接一个,通过挤压,将萃取柱中的液体排出萃取柱。也可采用正、负压固相萃取装置对批量样品进行固相萃取。
随著科学技术的发展,样品数量不断增加,越来越多的分析实验室开始采用自动固相萃取仪器,尤其是多通道固相萃取仪器来处理批量样品。
(作用):也称为溶剂化,加入适当的溶剂,使吸附剂上的-团膨胀,并去除可能在吸附剂上出现的干扰,反相吸附剂通常使用中极性溶剂(如),而正相吸附剂则使用弱极性或非极性溶剂(如-)。
洗脱和收集分析物(另一种情况是保留杂质而分析物通过柱子)
在反相萃取柱上,清洁溶剂为含有农业生产系统适当浓度的溶剂的水或缓冲液;
为确定清洗溶剂的浓度和体积,将试样加到 spe柱上,用5~10倍 spe柱体积的溶剂进行清洗,对流出液进行连续分析,得到清洗溶剂对分析物的洗脱曲线。按顺序增大清洗溶剂强度,根据分析物在不同强度下的洗脱曲线,确定合适的清洗溶剂强度和体积;
洗脱和收集目的:将分析物全部洗脱并以小体积级分方式收集分析物,同时在 spe柱上尽可能保留比分离物保留力-的杂质;
收集的分析物级分可被氮气吹干,然后溶解在小体积溶剂中,以提高分析物的浓度,或调整溶剂性质以作后期分析。
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