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原位杂交电话 武汉思特进公司

发布者:武汉思特进科技发展有限公司  时间:2021-11-13 






多彩色荧光原位杂交技术多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mfish)是在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术,它用几种不同颜色的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个靶位,各靶位在荧光显微镜下和照片上的颜色不同,呈现多种色彩,因而被称为多彩色荧光原位杂交。它克服了fish技术的局限,能同时检测多个基因,在检测遗传物质的突变和染色体上基因定位等方面得到了广泛的应用(杨明杰等1998)。



原位杂交技术应用于染色体、细胞和组织切片等样品中进行-特-检测,与免6疫组化技术的结合应用,能将dna、mrna和蛋白水平上的基因活性与样品的显微拓扑信息结合起来。1969年pardue和gall将放9射性标记的探针直接应用于纯化-的杂交,此后得益于分子克6隆技术的发展,及不同探针标记系统和检测系统的应用,大大增加了原位杂交检测的应用灵活性和检测灵敏度。



杂交液中的阳离子浓度通过静电排斥作用影响了杂交体之间的链稳定性,较高的盐浓度将增加杂交体的稳定性。大于0.4m的na离子浓度,对tm值、双链复性速率的影响不大,但随着na离子浓度的降低,将-影响tm值和双链复性速率。

有2机溶2剂-胺的作用是降低dna-dna和dna-rna等双链体的解链温度。通常dna需要在0.1~0.2m na+ 90~100℃的条件下变性,那么应用于原位杂交,样品必须在65~75℃的条件下进-时间变性,这将导致样品形态学的破坏。50%-胺的应用能将杂交温度降至30~45℃。

-葡聚糖具有很强的水合性,高浓度的-葡聚糖会使得-分子无法获得周边亲水环境,增加了探针浓度,加快杂交反应速率。




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