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用作固定相的有硅胶、活性炭、氧化铝、离子交换树脂、离子交换纤维等,或是在硅藻土和纤维素那样的无活性的载体上附着适当的液体,也可使用其他物质。将作为固定相的微细粉末状物质装入细长形圆筒中进行的层析称为柱层析column chromatogra-phy,在玻璃板上涂上一层薄而均的物质作为固定相的称为薄层层析thin-layer chromatography,后者可与用滤纸作为固定相的纸上层析进行同样的分析,即在固定相的一端,点上微量试料,在密闭容器中,使移动相液体从此端渗入,移动接近另一端。通过这种展开操作,各成分呈斑点状移动到各自的位置上,再根据rf值的测定进行鉴定。当斑点不易为肉眼观察时,可利用适当的显色剂,或通过紫外灯下产生荧光的方法进行观察。也可采用在种移动相展开后再用另一移动相进行展开这时的展开方向应与原方向垂直,使各成分分离完全的双向层析two-dimensional chromatography。
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在传统间歇式色谱法中,实验者只能采用单根色谱柱进行分离纯化,上样时只能序列式上样洗脱,这种方法虽然适合于绝大多数分离纯化,但其对于纯化介质的利用率并不高;在新型的连续色谱层析法中,实验者可以同时平行使用多根色谱柱并进行上样和洗脱,整个洗脱过程处于不间断的持续进行中,这种方法可以-使用更少的缓冲液来 ffffff;>i ffffff;>i
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