盘锦CN固相萃取柱规格常用解决方案「在线咨询」

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固相萃取(solid phase extraction，简称 spe)是一种以液-固色谱分离为基础的前处理技术，可对目标化合物进行选择性吸附和选择性洗脱。按保留机理，力主要分为无极力作用、极力作用、离子交换(静电吸引)。

反相态是 spe小柱中相对于流动相极性较低的分离态。本发明主要利用固定相---团的碳氢键和目标化合物的碳氢键之间的非极性作用力，适合从极性基质中提取分离非极性和中极性的目标物。

对由非极性力吸附到反相 spe柱上的目标物，可用弱极性溶剂，如氯1仿、环己1烷、乙1酸乙1酯等洗脱。只有当溶剂的洗脱强度足够大时，才能使目标物与吸附剂之间的范德华力破坏，使目标物从 spe柱洗脱。即使是极性---的甲1醇，对许多化合物而言，也有足够的非极性力量来洗脱它。有时候，单种溶剂无法---洗脱疏水性强的目标物，可以考虑使用二1氯甲1烷：乙1酸乙1酯(1:1，体积比)。

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正相填充(silica,nh2, cn, florisil, diol, carb,alumina-n, a, b)

*分析物：中等极性至强极性

*基质：从非极性到中极性

·方法：

(a)激1活：非极性有机溶1剂(通常由上样液所在的有机溶1剂激1活)

(b)洗脱：非极性有机溶1剂(一般是上样液所在的有机溶1剂)

在反相-固相萃取模式中，溶剂体系的极性应按样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的顺序递减，而溶剂体系的洗脱强度应逐渐增加。要---所选的样本溶剂不会洗脱目标化合物，所选的淋洗剂应在不洗脱目标化合物的前提下，很大限度地洗脱干扰物，所选的洗脱剂应能恰巧完全洗脱目标化合物。

作用机理：在许多固相萃取材料的极性表面和样品中目标化合物的极性---团之间会产生极性作用力。普通吸附剂极性力作用在色谱中通常称为正相色谱吸附剂。极性力比非极性力---，但比离子力更弱。常用的极性基团有---，胺基，巯基等。由于非极性溶剂不能与极性固定相材料形成具有氢键的---团，因此非极性基质环境对吸附剂和目标化合物之间的极性作用力是有利的。结果表明，在极性作用下，样品的固相萃取过程中，基质主要是非极性的，如正---、---甲1烷、菜油等，而目标化合物中多含有极性大的---团。

含碳量

碳量是指填料的含碳量，从侧面反映了c18的修饰程度，在分离效果和目标成分保持时间方面起着重要作用。对于相同类型的填料，高碳柱上的非极性化合物比高碳柱上的碳含量高，碳链增大，同时也增加了结合相的非极性作用面积。c18碳含量由不同的键合工艺决定，市场上c18碳含量一般在17-22%之间，也有一些特殊c18碳含量超过22%，但低于14%的c18填料。大部分样本可以用普通碳含量的c18来解决。而c18的含碳量也并非越多越好，根据样品性质和纯化需要选择不同含碳量的c18，例如，极性较大的化合物在高含碳量的c18中的保留程度不如低含碳量的c18。

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选用 spe柱规格的原则是，首先要--- spe柱的填料具有足够的容量，以便将目标化合物100%保留在柱体上。另外，填料也不易过量。填充物越多，溶剂对目标化合物的洗脱效果就越好。

所以在选择 spe柱规格时，一定要考虑 spe柱的容量。柱容是指一单位的填料以主要力保持其。键合型硅胶柱容量一般为1%~5%。

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例如， spe柱的填料为100 mg，其大容量一般不超过5 mg。该离子交换剂柱容量约为0.5~1.5 meq/g。需要-的是，由于我们面对的是多种混合物，除了目标化混合物之外，还存在很多干扰。

因此，在选择柱状规格时，必须考虑到目标化合物及其在萃取条件下可能吸附的总数量，而不能只考虑目标化合物。另外，即使目标化合物未超过柱容量， spe柱在保留目标化合物的同时也保留了部分干扰物，由于两者的总量已超过柱容量，其结果必然是部分目标化合物无法保留在 spe柱中。所以为安全起见，建议柱容好比目标化合物估计含量高一倍。

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当选用柱状规格时，必须考虑到目标化合物和在萃取条件下可能吸附的总干扰物，而不仅仅是目标化合物。另外，即使目标化合物未超过柱容量， spe柱在保留目标化合物的同时也保留了部分干扰物，由于两者的总量已超过柱容量，其结果必然是部分目标化合物无法保留在 spe柱中。

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预处理溶剂和参数的选取：

确定预处理 spe柱所用溶剂及其用量和流速，并进行平衡。在反相或离子交换柱中，通常以或极性为预处理溶液，以水或缓冲溶液为平衡溶液。

样本过柱流速度的选择：下一步是确定样品通过 spe柱流动速度。过柱流速与 spe试样中填充物的粒径分布、填充物的填充密度、目标化合物与试样基质的结合程度、试样的粘度等因素有关。