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hplc定性分析的主要方法与技术。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， hplc使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地运用色谱的一些基本知识对有机化合物所作的反应，从而得出有机化合物应具有的性质。hplc中，两种相同的物质在同一色谱中应具有相同的保留值，因此， hplc中的定性分析就能充分地应用到这一原理，用相同的色谱对未知物质进行简单的成分和性质判断，同时在同一物质组分下色谱上形成的未知峰保留值也是一样的，这样就可以初步判定未知有机化合物。hplc的流动相在此基础上，适当改变流动相来判断未知有机化合物的基本性质，而在连续变化的过程中，当发现两个保留值峰值相同时，我们可以简单地判断为未知有机化合物的性质相同。尽管 hplc的保留值定性分析方法可以区分同样的物理性质，但不能-具有相同保留值的两个有机化合物是同一种物质，因此在实际应用中， hplc利用保留值定性分析的方法虽然简单，而且很具操作性，但适用范围较窄，不能适应更多未知有机化合物的性质判定。

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远古罗马时期，人们就知道将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上，通过观察溶液展开所形成的同心圆环，对染料和色素进行分析。事实上，这种简单的操作已经运用了现代色谱的基本原理。

19世纪中期，德国化学家 runge对古罗马人的这一做法进行了重大改进，使其具有-的重复性和定量能力，使得盐溶液可以在纸-离；此外，化学家goppalsr-oeder也将染料和动植-素分离在长条形纸上，这些研究标志着纸色谱法的建立，并逐渐发展成现代色谱技术。

在1903年的华沙自然科学学会生物学会会议上，-植物学家 tswett提出了利用吸附原理分离植-素的新方法，这是现代色谱学的开端。-植物学家 tswett在1903年召开的华沙自然科学学会生物学会会议上发表。把碳酸钙放入直立的玻璃柱中，从顶端注入植-素的石i油醚浸取液，再用溶剂冲洗，使溶质在柱的不同部位形成色带，首i次向人们公开展示了用色谱法提纯的色素溶液以及色谱图显示的彩色环带柱管。tswett把这种方法命名为色谱，填充管称为固定相，冲洗剂称为流动相。

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色谱法是一种色谱法。层析法有两种相，一相为流动相，另一相为固定相。如液体为流动相，则称为液相色谱，而流动相为气体，称为气相色谱。

气体色谱法的优点：

分选效i率高，分析速度快，如能在2小时内将汽i油样品分离出200多个色谱峰，一般分析样品20分种即可完成。

气样用量少，检测灵敏度高，如气样用量1毫升，液体样品用量0.1微升固体样品的用量为几微克。使用合适的检测仪可以检测到百万分之十到十亿分之一的杂质。

选择性好，可分离、分析恒沸混合物，具有相似沸点的物质、某些同位素、顺式异构体邻、间、对位异构体、旋光异构体等。

适用范围广，虽然主要用于各种气体及易挥发有机物的分析，但在一定条件下，还可对高沸物和固体样品进行分析。主要应用领域为石油工业、环境保护、-化学、制药和食品工业。

sciex毛细管电泳仪代理——广州联方实验器材有限公司可为您提供实验室和生产所需要的sciex耗材

毛细管电泳中，样品分子的迁移是有效电泳浊度和电渗流清洁度的综合表现，而此时的清净度被称为表观清净。由于石英(或玻璃)毛细管表面的硅-解离，在大多数水溶液中都会产生一种负的定域电荷，并指向负极。毛细管中的电渗率比电泳速度大一个数量级，因此样品组分可以实现同向泳动。在电渗和电泳中，正离子的运动方向是一致的，所以它首先流出。中立分子与电渗流同速，随电渗入。负离子在中性颗粒后面流出，其运动方向与电渗方向相反。ph值与电渗流有密切关系。电渗透受 zeta电位的影响， zeta电位由毛细管壁表面的电荷决定，而电荷又受缓冲溶液的 ph值影响，因此电渗流的值是缓冲溶液 ph值的函数，一般随 ph值的增加而增大，到中性或碱性时值会变得很大。另外，毛细管洗涤过程、电泳缓冲液组成、粘度、温度等对管壁上解离的影响也会发生变化。电磁以及许多能与毛细管表面作用的物质，如表面活性剂、蛋白质等，对电渗流有很大影响。

电泳法作为一种伴随电泳产生的电动现象，在电泳法中起重要作用。大多数情况下，电渗流速度是电泳速度的5-7倍。毛细管电泳(ce)利用电渗流，使中性分子、正负离子向一个方向发生差速迁移，在一次 ce过程中同时完成正负离子的分离测定。电渗流的大小和方向影响着 ce分离的效率、选择性和分离程度，因而成为分离条件优化的重要参数。ce分离的重复性(迁移时间和峰面积)受电渗流的微小变化-影响。因此，电渗流的控制是 ce的一项重要工作。控制电渗流的方法主要是改变缓冲液的组成和浓度、改变缓冲液的 ph值、添加添加剂、对毛细管内壁进行改性-物理或化学方法上涂覆及动态去活；外加径向电场；改变温度等。