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动物组织原位杂交电话 武汉思特进公司

发布者:武汉思特进科技发展有限公司  时间:2021-11-15 






原位杂交试验

收集斑马鱼的胚胎,在holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%-固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲6醇2%-溶液洗,然后换成甲9醇,在-20c 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧6水处理,去除色素。或者使用-锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)




原位杂交是指;分子杂交的一种形式。由未经抽-离的染色体dna,在原来位置上被变性成单链后,与探针进行分子杂交。1977年由本顿(w.d.benton)和戴维斯(r.w.davis)在原分子杂交基础上发展的一种较新的分子杂交技术。方法是将菌落或噬菌斑转移到硝9酸纤维素滤膜上,使在原位发生溶菌后变性的dna,同滤膜原位结合,再与有放5射性同位素标记的特定核苷酸“探针”杂交,其结果可用放5射自显影来显示,出现银粒的地方便是待测染色体dna上与探针互补顺序所在的位置。对快速检测转化群落中的dna序列或任何一种插入的dna序列,以及动植物的基因定位工作,都具有广泛应用价值。(见“分子杂交”、“放5射自显影”、“影印培养技术”)



原位杂交组织或细胞化学技术简称原位杂交in situ hybridization, ish是应用已知碱基顺序并带有标记物的-探针与组织细胞内待测的-,按碱基互补配对原则进行特-结合,形成杂交体,然后用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免3疫组织化学方法在-原有位置进行细胞内定位、定性和定量研究。为分子水平研究细胞内基因表达及有关细胞5因子的调控提供了有效的工具。可视为组织化学与免3疫组织化学的重大突破。

原位杂交不需要从组织中提取-,对于组织中含量极低的靶序列有-的敏感性,并可完整地保护组织和细胞的形态,更能准确地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。






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