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原位杂交仪制造厂家电话「在线咨询」

发布者:武汉思特进科技发展有限公司  时间:2021-11-16 






原位杂交是指将特定标记的已知顺序-为探针与细胞或组织切片中-进行杂交,从而对特定-顺序进行精0准确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

原位杂交in situ hybridization将标记的-探针与细胞或组织中的-进行杂交,称为原位杂交。

使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。



原位杂交技术应用于染色体、细胞和组织切片等样品中进行-特---检测,与免6疫组化技术的结合应用,能将dna、mrna和蛋白水平上的基因活性与样品的显微拓扑信息结合起来。1969年pardue和gall将放9射性标记的探针直接应用于纯化-的杂交,此后得益于分子克6隆技术的发展,及不同探针标记系统和检测系统的应用,---增加了原位杂交检测的应用灵活性和检测灵敏度。



杂交技术zui重要的因素之一是选择zui适的杂交反应温度。若反应温度低于tm 10~15℃,碱基顺序高度同源的互补链可形成稳定的双链,错配对减少。若反应温度再低tm-30℃,虽然互补链之间也可形成稳定的双链,但互补碱基配对减少,错配对增多、氢键结合的更弱。如两个同源性在50%左右或---些的dna,调整杂交温度可使它们之间的杂交率变化10倍,因此在实验前必须首先确定杂交温度。通常有三种温度可供试验,即zui适复性温度、苛刻复性温度及非苛刻复性温度。温度的选择及温度对杂交的影响见表18-3。


zui适复性温度optimunm renaturation temperature, tor:tor =tm –25℃

苛刻复性温度:ts = tm – (10或15℃)

非苛刻复性温度:tns =tm – (30或35℃)






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