IP-WB活性检测试剂盒服务为先「武汉纽斯特」

1.抗活性arf 6，小鼠单克l隆抗l体货号26918：一小瓶– 22 μl1

含50％甘油和0.05％---l化钠的pbsph 7.4中的浓度mg / ml。 该抗l体特---识别所有脊椎动物的arf 6-gtp。

2.蛋白a / g琼脂糖目录号30301：一小瓶– 400 μl 50％浆液。

3. 5x测定/裂解缓冲液目录号30302：一瓶– 30 ml的250 mm tris-hcl，ph 8，750mm nacl，50 mm mgcl2，5 mm edta，5％triton x-100。

4.抗arf 6，兔多克l隆抗l体货号21032：一小瓶– 100 μl1 mg / ml

ph 7.4的pbs中含有50％的甘油。

5. 100 xgtpγs目录号30303：1瓶– 100 μl，10 mm，使用5 μlgtpγs标记0.5 ml细胞裂解液。

6. 100 x gdp产品目录号30304：一个样品瓶– 100 μl，100 mm，使用5 μl gdp标记0.5 ml细胞裂解物。

检测步骤

ι。活性cdc42 pull-down实验

1. 等分0.5-1 ml的细胞裂解物至微量离心管中。

2. 向管中加入1ml的1x assay/lysis 缓冲液。

3. 向管中加入1ul的活性cdc42单克l隆抗l体。

4. 用涡旋振荡仪将protein a/g凝胶柱充分混匀，然后快速的吸出20ul悬浮珠浆液加入离心管中。

5. 将管置于4°c条件下孵育1h，并轻轻的进行摇动。

6. 5000g，离心1分钟。

7. 弃上清，这一步要非常小心以避免珠子的损失。

8. 用0.5 ml的1x assay/lysis缓冲液洗涤珠子三次，离心并弃去上清。

9. 后一次洗涤后，小心的移去所有的上清。

10. 用20ul的2x sds-page样品缓冲液重悬样品。

11. 样品煮沸5min。

12. 5000g，离心10s。

gtpases的rab家族调节真核水泡膜运输。 rab35与两个血浆

膜和内体定位，并涉及到包括t细胞受体回收，卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 rab35调节神经元样细胞中的神经突生长，并可以-突起。

当前没有直接测定法来测量rab35 gtpases的活化。

neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆

特---识别rab35 gtp而不识别rab rab35 gdp的抗l体。鉴于...的高度亲和力

抗原的单克l隆抗l体，可以在短时间内进行激l活测定。这个

分析提供了---的结果，并具有一致的可重复性。

这些抗rab35 gtp单克l隆抗l体也可以用于监测大鼠rab35的激l活。

1细胞和组织中的免l疫组织化学。

neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒提供了一种简单快速的方法来监测

rab35的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。

分析原理

neweast biosciences arl1激l活检测试剂盒基于配置特---抗arl1-gtp从细胞提取物或体外检测活性arl1-gtp水平的单克l隆抗l体gtpγs负载arl1活化分析。简而言之，抗活性arl1小鼠单克l隆抗l体将用含有arl1-gtp的细胞裂解液培养。然后，绑定的活动arl1将被下拉蛋白质a/g琼脂糖。用抗arl1兔多克l隆抗l体或抗arl1小鼠单克l隆抗l体进行免l疫印迹分析，检测沉淀的活性arl1。

需要但未提供的材料

1---性和非---性细胞裂解物

2蛋白酶抑制素

4°c摇管器或振动筛

40.5 m edta，ph8.0

51百万氯---

62x还原sds-page样品缓冲液

7电泳和免l疫印迹系统

8免l疫印迹洗涤缓冲液，如tbst10 mm tris hcl，ph 7.4，0.15 m nacl，0.05%

吐温-20

9免l疫印迹阻断缓冲液含5%脱脂奶粉或3%牛血l清白蛋白的tbst

10pvdf或硝化纤维膜

11次级抗l体

12ecl检测试剂