微生物限度检测服务介绍「世纪久海」
{微生物检测}
{微生物检测}微生物分离纯化
微生物限度检查
微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温---和---的计数。
当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物限度标准时,应按下述规定进行检验,包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外,本法不适用于活菌制剂的检查。
微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。检验全过程必须严格遵守无菌操作,防止再污染,防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。
如供试品有抗jun活性,应尽可能去除或中和。供试品检查时,若使用了中和剂或灭活剂,应确认其有效性及对微生物---性。
供试液制备时如果使用了表面活性剂,应确认其对微生物---性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。
计数方法适用性试验
1.供试液制备
根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1 小时。
常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用,应建立其他适宜的方法。
1水溶性供试品 取供试品,用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液,或ph7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。若需要,调节供试液ph值至6~8。---时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落,取单个菌落制成悬液,重复上述步骤数次,便可得到纯培养物。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
2水不溶性非油脂类供试品 取供试品,用ph7.0无菌----蛋白胨缓冲液,或ph7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基制备成1:10供试液。分散力较差的供试品,可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80,使供试品分散均匀。若需要,调节供试液ph值至6~8。4、浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。---时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。
3油脂类供试品 取供试品,加入无菌十四烷酸---酯使溶解,或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无---性的无菌表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40℃特殊情况下,zui多不超过45℃,小心混合,若需要可在水浴中进行,然后加入预热的稀释液使成1:10供试液,保温,混合,并在zui短时间内形成乳状液。另一种方法是,在接种后,利用n2或co2取代培养基中的气体,然后在火焰上把试管口密封。---时,用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。
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