动物组织原位杂交电话「多图」
原位杂交是指将特定标记的已知顺序-为探针与细胞或组织切片中-进行杂交,从而对特定-顺序进行精0准确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。
原位杂交in situ hybridization将标记的-探针与细胞或组织中的-进行杂交,称为原位杂交。
使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。
原位杂交技术可应用于什么方面
1.细胞特---mrna转录的定位 可用于基因图谱、基因表达和基因组进化的研究。
2.感6染组织中---dna/rna的检测和定位,如eb---mrna、人类乳3头状瘤---和巨细胞---dna的检测。
3.癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。
4.基因在染色体上的定位。
5.检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。
6.分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传
根据不同的杂交实验要求,应选择不同的-探针。在大多数情况下,可以选择克0隆的dna或cdna双链探针。但是在有些情况下,必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和rna探针。例如,在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸探针,在检测单链靶序列时应选用与其互补的dna单链探针通过克0隆人m13噬菌体dna获得或rna探针,寡核苷酸探针也可。长的双链dna探针特---较强,适宜检测复杂的靶核苷酸序列和病原体 ,但不适宜于组织原位杂交,因为它不易透过细胞膜进入胞内或核内。在这种情况下,寡核苷酸探针和短的pcr标记探针80~150bp具有较大的---性。
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