硅胶固相萃取柱分类-「硕谱生物」
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反相模式下,溶剂体系的极性应以样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的次序递减,并以递增程度递减。要-所选择的样本溶剂不会洗脱目标物,所选择的淋洗剂应在不洗脱目标物的前提下,很大限1度地洗脱干扰物,所选洗脱剂应能碰巧完全洗脱目标物。
正相位模式是 spe小柱相的固定相极性大于流动相极性的分离模式。主要用途:
固相萃取材料极性表面与物极性-团极性相互作用;极性力比非极性力强,但比离子力弱;常用的极性基团有-,胺基,巯基等。弱极化基质环境有利于形成极性力,因为弱极化溶剂不能与极性固定相形成氢键功能团。结果表明: spe正相萃取后,样品基质多为弱极性,如正-、二1氯甲1烷、菜油等,而目标物多含有极性-团。
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渠道效应
当 spe小柱填料装实后,流速过小柱时,液体是以层流通过填料层,将填料层充分浸润,润湿的液面截层向上推进,见附图;流速过大时,柱床厚度过大,可能在填料内形成沟道,液流将穿过沟道,快速通过小柱,而使填料浸润不足,从而使得体与填料的接触面积大大减少,-影响填料对目标物质的保留性。
溶液环境的 ph如何影响化合物在柱状物上的保持性,我们为什么要关注该化合物的 pka值,这些因素需要放在c18柱状物上吗?
a:首先, ka指酸度系数,也称为酸离解常数,可以被理解为酸离解h离子的能力,而 pka=- lgka,对于酸,在环境中 ph离子的平衡如下
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gp-c18通用反相色谱柱特点:
利用高可控性的单分子层形成技术和封尾技术
*柱间重现率高
*选择性和分离效1率高
适宜于分离酸性1、中1性和碱性化合物,以及多种药1物和多肽等
建议使用有机溶1剂或有机溶1剂/水系统的流动相。
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无缝gp-c1用时比反相色谱柱特
预埋用容易高可控性的单分子成样品技术和封尾
整体*柱间重现
ptfe (聚四氟,特氟龙)
·建议采用单一进样;
·在质谱分析中较合适;
优良的溶剂耐受能力和化学相容性;
打孔之后不能重封;
·不建议长期存放样品。
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均衡(equilibrium):去除活化溶剂为上样创造合适的溶剂环境,使用的溶剂通常与样品溶液的溶剂一致;对于离子交换柱来说,样品在碱性化合物平衡液中经常需要添加酸,在酸性化合物平衡液中经常需要添加碱;保留(retention):样品溶液在吸附剂作用下,吸附剂对某些化合物的作用超过了其对溶剂的作用,这一过程称为保留。
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浸渍:上样后,部分干扰物与目标化合物同时被保留,因此需要加入适当的溶液来大限度地去除干扰物而不影响目标化合物的保留,通常使用上样溶剂进行浸渍不会影响回收率,但洗脱强度较人的溶剂能大限度地去除干扰物,选择淋洗液时需要在回收率和净化效果之间找到平衡;
冲洗(冲洗):让有较强冲洗能力的溶剂通过吸附剂,打断吸附剂与保留的化合物之间的作用力,使这些化合物与吸附剂一起流出;一般情况下,能够正好冲洗目标化合物的冲洗溶剂是-择,此时冲洗物少,选择冲洗液时也需要在回收率和清洗效果之间找到平衡。
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