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液相色谱柱的再生

因为，色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说是柱效的下降。

1.反向柱的再生：

2.正相柱的再生：

3.离子交换柱的再生：

长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

-说明：

再生过程必须随时关注柱压变化，柱压过高易导致硅胶变形与开裂及键合相极性端连接顺序紊乱，同时要-再生时间足够。再生时尽量选择不具备在线脱气的独立泵送系统色谱仪器进行

液相色谱柱分离系统包括什么

分离系统主要由色谱柱组成，是 气相色谱仪 的-，它的功能是使试样在柱内运行的同时得到分离。色谱柱基本有两类：填充柱和毛细管柱。填充柱是将固定相填充在金属或玻璃管中常用内径4 mm。毛细管柱是用熔融二氧化硅拉制的空心管，也叫弹性石英毛细管。柱内径通常为0.1mm～0.5mm，柱长30m～50m，绕成直径20cm左右的环状。用这样的毛细管作分离柱的气相色谱称为毛细管气相色谱或开管柱气相色谱，其分离效率比填充柱要高得多。可分为开管毛细管柱、填充毛细管柱等。填充毛细管柱是在毛细管中填充固定相而成，也可先在较粗的厚壁玻璃管中装入松散的载体或吸附剂，然后拉制成毛细管。如果装入的是载体，使用前在载体上涂渍固定液成为填充毛细管柱气-液色谱。如果装入的是吸附剂，就是填充毛细管柱气-固色谱。这种毛细管柱近年已不多用。开管毛细管柱又分以下四种：壁涂毛细管柱。在内径为0.1mm～0.3mm的中空石英毛细管的内壁涂渍固定液，这是目前使用*多的毛细管柱。载体涂层毛细管柱。先在毛细管内壁附着一层硅藻土载体，然后再在载体上涂渍固定液。小内径毛细管柱。内径小于0.1mm的毛细管柱，主要用于快速分析。大内径毛细管柱。内径在0.3mm～0.5mm的毛细管，往往在其内壁涂渍5μm～8μm的厚液膜。

液相色谱仪在生物制药中的应用

液相色谱仪是近几十年发展起来的一种、快速的分离分析技术，是现代分离检测的重要工具。液相色谱仪是以-液相色谱仪为基础，引入气相色谱仪的理论和实验方法，将流动相改为高压输送，采用固定相和在线检测等手段，发展而成的分离分析技术，具有高压、高速、、高灵敏度、高选择性和应用范围广等特点，成为生物制药领域发展快、应用的现代分析技术之一。

液相色谱柱性能评价

色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度>;20μm时，干法填充制备柱较为合适；颗粒<20μm时，湿法填充较为理想。填充方法一般有4种：高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；径向加压法，waters；轴向加压法，主要用于装填大直径柱；干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。