复合SPE柱类型咨询「硕谱生物」
广州硕谱生物科技有限公司,反相spe柱,是目前国内生产spe小柱较好的生产厂家。复合spe柱类型
通常用 mg/ml来表示固相萃取小柱的规格,其中 mg/ml表示填充物重量,填充物上一次可容纳的zui大溶液体积。
淋洗容量通常是填充床容量的2-5倍。
吸收量:硅胶基质填料可吸附的很大吸收量和干扰量,一般不超过填料重量的5%;
所能吸附的聚合物基质填料zui大重量,一般不超过填料重量的10-15%。
所以在选择固相萃取小柱规格时,首先要估计好被吸附物和干扰物的重量,然后去换算就知道应该选择什么规格更合适了!
例如, waters oasis hlb 30 cc/60 mg,这是一种高分子填充物,它可以吸附10-15%-60 mg的被测物质和干扰物重量=6-9 mg。
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圆柱形容积
对同一种填料产品,在填料量一定的情况下,采用较小的柱管体积,流动较慢。由于圆柱体体积越小,横截面越小,填充高度越高,流动相阻力就越大,从而使流速变慢。因此,在实际检测工作中,如果对上样量和上样流速有要求,在不影响固相萃取效果的情况下,可选用大体积积柱管或大通量膜片装置, cnw的 disk盘片上样速度可达50 ml/min,在处理大型水样时具有明显的流速优势。
溶液的选择与使用
许多教师在实验过程中很容易忽略溶剂的选择,如:c18小柱,一般用甲1醇活化,若用水活化,由于c18的疏水性,水的浸润速度会比甲1醇慢,导致流动速度变慢。遇有此情况,调整活化溶剂即可解决。
相对于弱酸性化合物而言,弱碱性化合物在阳离子交换固相萃取过程中99%的分解都是阳离子,这一弱碱性化合物所处的环境系统的 ph值必须低于其 pka至少两个 ph单位。洗脱时,环境体系的 ph值应高于化合物的 pka值至少两个 ph单位,99%的化合物此时为中性状态,可通过适当的溶剂从阳离子交换柱中洗脱。
选择离子交换固相萃取柱的种类:为能有效地洗脱吸附在一起的离子化合物,对于含有强离子---团的目标化合物,一般选用弱离子交换柱;对于含有弱离子---团的化合物,一般选用强离子交换柱。该方法可避免目标化合物与吸附剂---团同时处于离子化状态,使目标化合物始终保持在不能洗脱的保留状态。
有时,强溶剂 b也不能除去色谱柱中残留的污染物。然后需要使用---的溶剂或混合多种溶剂。若污染物不是生物质,一种强溶剂或多种溶剂的联合清洗基本上可以解决这个问题。圆柱制造商的网页和产品说明书中也有许多清洁方法的建议。各种清洁方法的模式通常相似,溶剂系列中使用的溶剂的强度逐步提高,zui后一种溶剂往往非常具有非极性(疏水性)(例如乙i酸乙i酯甚至是烷烃),以便于将脂质、油等非极性污染物溶解。每一种溶剂在一个溶剂系列中---与另一溶剂互溶。在整个清洁过程结束后,在返回到原来的流动相系统之前,必须要通过一种强度适中、互溶性---的溶剂过渡。举例来说,---i醇是一种---的过渡溶剂,它可以与正---或---甲i烷以及水相中的溶剂互溶。但---i醇粘度很大,必须---低流速,以免使泵压过高。
(在使用这些清洁溶剂之前,可与柱子供应商协商,以---它们不会对填料造成损害。硅树脂基质中的柱状物一般都可以用,但是某些洗涤溶剂的配方可能导致有机聚合物基质的填充物膨胀或收缩,从而影响其色谱特性。)此外,---上表所用的清洁溶剂与以前使用的溶剂可互溶,丙i醇可作为---的过渡。每一个溶剂系统至少要冲洗20个液柱体积。因为某些溶剂系统粘度较大,应相应调整冲洗流速,以---不超过泵的压力。在用完胍或脲等溶剂清洗过的柱子上,至少要用40~50柱体积的 hplc级纯水进行冲洗。对反相柱来说,不使用十二烷---酸钠(sds)和 trition等表面活性剂,因为这些化合物一定会牢固地吸附到硅胶结合相柱上,因此难以去除。使用表面活性剂可以改变填料的表面性能。但是, separationgroup的研究表明:多肽合成过程中产生的保护基和清除剂对柱体的污染,可通过向流动相中加入500μ l1% sds溶液,以1 ml/min的速度清除。以5%~95% ebn/1%(v/v)的三i氟乙i酸梯度洗脱后,在平衡起始条件下,柱体的多肽分离功能得以恢复。
在反相-固相萃取模式中,溶剂体系的极性应按样品溶剂、淋洗溶剂、洗脱溶剂的顺序递减,而溶剂体系的洗脱强度应逐渐增加。要---所选的样本溶剂不会洗脱目标化合物,所选的淋洗剂应在不洗脱目标化合物的前提下,zui大限度地洗脱干扰物,所选的洗脱剂应能恰巧完全洗脱目标化合物。在许多固相萃取材料的极性表面和样品中目标化合物的极性---团之间会产生极性力。通常使用极性力的吸附剂在色谱中被称为正相色谱吸附剂。极性力比非极性力---,但比离子力更弱。常用的极性基团有---,胺基,巯基等。
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