原位杂交电话「多图」

原位杂交试验

收集斑马鱼的胚胎，在holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%-固定，在4℃保存，二十四小时后用50%甲6醇2%-溶液洗，然后换成甲9醇，在-20c 保存，待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧6水处理，去除色素。或者使用-锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成)

显色原位杂交 (cish)

显色原位杂交 (cish) 能让您利用组织学实验室中已经存在的方法在组织形态学背景下获取遗传信息。 我们提供用于cish分析的cish dna探针和关键试剂。

荧光原位杂交 (fish)

多重荧光原位杂交 (fish) 能让您利用单一样本同时检测多个靶标并直观显示共定位情况。 使用不同光谱的荧光基团标记每种不同的杂交探针，这种方法能让您在单一样本中解析多种遗传成分或多基因表达模式，并提供多色直观显示。

杂交技术zui重要的因素之一是选择zui适的杂交反应温度。若反应温度低于tm 10～15℃，碱基顺序高度同源的互补链可形成稳定的双链，错配对减少。若反应温度再低tm-30℃，虽然互补链之间也可形成稳定的双链，但互补碱基配对减少，错配对增多、氢键结合的更弱。如两个同源性在50%左右或-些的dna，调整杂交温度可使它们之间的杂交率变化10倍，因此在实验前必须首先确定杂交温度。通常有三种温度可供试验，即zui适复性温度、苛刻复性温度及非苛刻复性温度。温度的选择及温度对杂交的影响见表18-3。

zui适复性温度optimunm renaturation temperature, tor：tor =tm –25℃

苛刻复性温度：ts = tm – (10或15℃)

非苛刻复性温度：tns =tm – (30或35℃)