蛋白质上样缓冲液- 武汉友名生物公司

rna-检测试剂盒用于定性检测和分析rna-和rna分子，-适合检测-等此类-。

组分1. conviflex? rt-taq mix的-包含：mulv逆转录酶、taq聚合酶及dntp。

其中mulv逆转录酶，来自小鼠白血1病-m-mulv并经过基因修饰。

这里的taq聚合酶另-热启动功能。

此taq酶在室温下，活性被抗1体所抑制，当温度达到70°c以上时，才会被完全激1活。

在70°c 以下时，由于taq酶没有完全活化，因此实验不会产生非特-pcr产物和引物二聚体。热启动taq酶的使用可使pcr具有更高的特-和灵敏度。

转移rna

转移rnatrna在蛋白质合成过程中负责转运-酸、-mrna遗传密码。trna占细胞总rna的10%~15%，绝大多数位于细胞质中。trna由crick于1955年提出其存在，zamecnik和 hoagland于1957年鉴定。

trna一级结构具有以下特点：

是一类单链小分子rna，长73~95nt共有序列76nt，沉降系数4s。

是含稀有碱基zui多的rna，含7-15个稀有碱基占全部碱基的15%~20%，位于非配对区。

5′末端碱基往往是鸟piao呤。

3端是cca序列，其中的腺苷酸常称为a76，其3—oh是-酸结合位点。

与dna不同，rna一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多rna也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。

rna的碱基配对规则基本和dna相同，不过除了a-u、g-c配对外，g-u也可以配对。

在细胞中，根据结构功能的不同，rna主要分三类，即trna转运rna，rrna核糖体rna，mrna信使rna。mrna是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的dna所转录；trna是mrna上碱基序列即遗传密码子的识别者和-酸的转运者；rrna是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。

回收产物的检测

1.紫外分光光度计法检测dna在od260处有明显吸收峰，当od260=1时，相当于大约50 ng/μl双链dna、40 ng/μl单链dna。od260/od280≈1.6~1.9时，说明dna纯度较高。若洗脱时不用洗脱缓冲液，而是用去离子水，会使比值偏低，因为离子的存在会影响吸光度。但不表示纯度低。

2.sybr法检测取回收产物1 μl，与1 μl sybr染料混匀，于荧光透1视仪下观察是否有黄绿色荧光。

3.琼脂糖凝胶电泳法检测取回收产物5 μl，与10×loading buffer混匀，dna marker加5 μl，电泳后凝胶成像观察。5 μl dna marker相当于每个条带50 ng dna，观察目的条带亮度大致为marker的两倍，则大致估算其浓度约为20 ng/μl。