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分光光度法原理要求照射在样品池上的单色光必须对应于样品吸收光谱中的某一个吸收峰的波长。由于仪器的制造和调整误差,单色光的实际波长与仪器的波长读数值间都存在一定的误差。样品中绝大部分的主要吸收峰都有一定的宽度,对波长准确度要求允许宽些。但是,当吸收峰宽度较小,而且吸收峰两侧边缘比较陡直,此时波长准确度的影响就必须引起注意。
1、比色皿架及比色皿在使用中的正确-问题。
有些使用者对这个问题不够重视,因操作不当造成偶然误差,-影响分析结果。
首先,应-比色皿不倾斜放置。稍许倾斜,就会使参比样品与待测样品的吸收光径长度不一致,还可能使入射光不能全部通过样品池,导致测试比准确度不符合要求。
其次,应-每次测试时,比色皿架推拉-。若不-,将影响到测试值的重复性或准确度。,还应-比色皿的清洁度,延长其使用寿命。
发送到样品的光束由光子束构成。
当光子遇到样品中的分子时,分子可以吸收其中的一些分子,减少光束中的光子数量并降低检测信号的强度。
透射率是穿过样品的光的一部分。它被定义为在入射光强度下穿过样品的光强度。
吸光度与透射率相反,对应于分光光度计测量的量。
根据吸光度,溶液样品中的浓度可以从比尔 - 朗伯定律确定,其表明吸光度和样品浓度之间存在线-。根据beer-lambert定律,吸光度是吸收系数的乘积,吸收系数是给定波长下溶质吸收的光量的量度,是光通过的距离。样品,或行进距离,以及溶质的浓度。通常,测量吸光度的目标是测量样品的浓度。
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