-提取-「多图」

人elisa试剂盒的原理及优势：

　　1、elisa是以immune学反应为基础，将抗原、antibody的特---反应与酶对底物的有效催化作用相结合起来的一种敏感性---的试验技术。

　　2、由于抗原、antibody的反应在一种固相载体──聚---乙1烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而---试验结果的特---与稳定性。

　　3、elisa生物试验是一种敏感性高，特---强，重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在immune学检验的各领域中。

　　4、elisa检测试剂盒适用于体外定性检测人血1清或血浆中的抗人类hev---mantibody elisa检测。

　　5、elisa的基础是抗原或antibody的固相化及抗原或antibody的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或antibody仍保持其immune学活性，酶标记的抗原或antibody既保留其immune学活性，又保留酶的活性。

elisa定量测定

elisa操作步骤复杂，影响反应因素较多，---是固相载体的包被难达到各个体之间的一致，因此在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。测定大分子量物质的夹心法elisa，标准曲线的范围一般较宽，曲线zui高点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数值，以检测物的浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈s形，其头、尾部曲线趋于平坦，中央较呈直线的部分是相对理想的检测区域。

测定小分子量物质常用竞争法，其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。标准曲线的形状因试剂盒所用模式的差别而略有不同。elisa测定的标准曲线注意图中横坐标为对数关系，这更有利于测定系统的表达。

dna提取过程中各种试剂的作用及原理

溶液ii-naoh-sds液：naoh：-在ph大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当ph>;12或ph<3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。 在溶液ii中的naoh浓度为0.2mo1/l，加抽提液时，该系统的ph就---12.6， 因而促使染色体dna与质粒dna的变性。

　　sds：

　　sds是离子型表面活性剂。它主要功能有：

　　(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。

　　(2)解聚细胞中的---白。

　　(3)sds能与蛋白质结合成为r-o-so3-…r+-蛋白质的复合物，使蛋白---性而沉淀下来。 但是sds能抑制核糖-酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中 (用rnase去除rna时)受到干扰。

提取dna常用的方法

　　一.酚抽提法：先用蛋酶k、sds破碎细胞，---蛋白，然后用酚和酚-氯dna大小为100-150kb

　　二.---胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度---胺解聚蛋白质与dna的结合，再透析获得dna可得dna200kb左右。

　　三.玻璃棒缠绕法：用---胍裂解细胞，将裂解物铺于---上，然后用带钩或u型玻璃棒在界面轻搅，dna沉淀液绕于玻棒。生成dna约80kb。

　　四.---1醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积---1醇替代---，可去除小分子rna(在---1醇中可溶状态)

　　五.表面活性剂快速制备法：用triton x-100a或np40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶k或酚去除蛋白，---沉淀或透析。

　　六.加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于pcr反应。

　　七.碱变性快速制备：先用naoh作用20分钟，再加hci中和，离心后取上清，含少量dna。