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泵用后不能及时清洗移动相中不得含有腐蚀性物质，含有缓冲液的流动相不能留在泵中，---是当泵停泵过夜或更久时。若含有缓冲液的流动相留在泵中，可能会析出盐的微晶，如上述固体颗粒那样损坏密封环和柱塞，甚至只是因为溶液处于静止状态时，会析出。所以，必须用纯水将泵完全清洗干净，然后转换成适合于保存色谱柱和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合硅胶固定相，可能是或-水)流相去空水泵工作时要注意防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则泵运转也会磨损柱塞、气缸或密封环，终造成泄漏。如果没有流动相的外流，没有压力指示怎么办？也许是泵内有大量的气体，此时可开启泄压阀，使泵在较大流量(如5 ml/min)下运转，排出气泡，也可用一个50 ml的针筒在泵出口协助抽气。另外一个可能的原因是密封环磨损需要更换。

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不稳定的压力和流量其原因可能是需要排除的气泡；或单向阀内有异物，可卸下单向阀，浸入内超声清洗。有时候可以是砂滤棒内部出现气泡，或者被细小盐粒或滋生微生物部分堵塞，此时，可卸下砂滤棒浸入流动相超声除气泡，或将砂滤棒浸入稀酸(如4 mol/l)中迅速除去微生物，或将盐溶解，再立即清洗。为什么压力太大还是太低？也许是管道堵塞了，需要清理清理。另一种可能是由于管道出现了泄漏。检验阻塞或泄漏时，应逐段进行。采用梯度洗脱时，由于多种溶剂混和，组分不断变化，产生了一些特殊问题，必须引起足够的重视。ps:(在液相色谱中对成分复杂的样品，采用梯度洗脱法。在同一分析周期内，---地改变流动相的浓度比例，称为梯度洗脱。这样，在一个复杂样品中，性质差异较大的组分，就能达到各自合适的容量因子 k的分离效果。

坡度洗脱的流动相选择不当要注意溶剂的溶解性，不相容性溶剂不能作为梯度洗脱的流动相。部分溶剂混溶于一定比例，超过一定范围后就不能互溶，使用时更要注意。同时，在与缓冲溶液混合时，也会发生与缓冲剂混合，在使用过程中需要---注意。不计空白梯度洗脱为------的重复性，梯度洗脱的溶剂纯度要求较高。由于弱溶剂中的杂质在色谱柱上被强溶剂洗脱，在分析样品之前，必须对样品进行空白梯度洗脱，识别溶剂杂质峰。分级洗脱溶剂需要完全脱气，以防止在混合过程中产生气泡。没有考虑溶剂混合引起的粘度变化由于混合溶剂的粘度随组分而变化，因此，在梯度洗脱过程中常常会发生压力变化。比如，和水的粘度都比较小，当它们以相似比例混合时，粘度增加很大，这时的柱压比或水为流动相时大一倍。所以在梯度洗脱时要注意防止压力超过输液泵或色谱柱可以承受的大压力。

六通阀的正确使用与维护样品进样前，要用0.45μ的滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。旋转阀芯时不要太慢，不要停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力急剧上升，甚至超过了泵的大压力；再转到进样位置，过高的压力会使柱头损坏。为了防止进样阀内的缓冲盐及样品残留，每次分析结束后应冲洗进样阀。一般可采用清水冲洗，或先用溶样溶剂冲洗，再用清水冲洗。

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柱材的选择应根据待分析的样品性质和试验条件确定。若要分析的样品易分解或有腐蚀性，应考虑使用玻璃管或聚四氟乙烯管。玻璃管柱的优点是化学惰性好，制备的柱子柱效高，便于观察柱子的填充，而玻璃管易碎是其缺点。ptfe管的优点是耐腐蚀，缺点是不耐高温高压。目前填充柱中通常采用 zui不锈钢管。其优点是不破碎，传热性好，柱---，可满足一般样品分析要求。其缺点是内壁较粗糙，活性较大，很难清洗干净。

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在使用前应对填充柱进行清洗处理，并进行试漏检测。清洁方法与管柱材料有关。对不锈钢管，一般采用10%热浸泡，抽去管内壁的油污，再用自来水洗净。若使用1:20的稀---溶液重复处理，则可明显降低对柱内壁的吸附。玻璃柱子的清洁可参考上述方法，不同的是一般用洗液浸泡。类似地，为了降低玻璃的内壁活性，可用5%二---硅i烷的溶液浸渍处理，然后用和分别洗净。气柱检漏方法比较简单：可将柱子泡在水中，堵死柱的一端，在另一端通气，若无气泡冒出，则说明柱子无泄漏现象。