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科学家们研究蛋白质结晶技术花费了很长时间。1988年诺贝尔化学奖被授予三位德国科学家,原因是三个人通力合作,在上解析了一种膜蛋白——菌光合反应中心的高分辨率三维结构,它拉开了膜蛋白结构生物学的序幕,在生物学界影响非常大。之后,科学家们在基因组学和蛋白质组学领域不断取得新进展,可以作为潜在靶向的蛋白质的数量呈指数级增加,然而这些方法获得有用晶体的成功率不足20%。
2011年,英国帝国理工学院和萨里大学的科学家们使用一种“分子印迹聚合物mips”的材料,研发出了一种更有效的制造蛋白质晶体的方法。但是这种方法在结晶条件成分复杂,包含高盐,,宽泛的酸碱区间等条件下,容易造成mips对蛋白质的印记作用失效。科研不断深入,技术不断迭代,目前,应用为广泛的晶体制备方法当属规模筛选,比如高通量蛋白质结晶筛选,即从成百上千个溶液条件中筛选出适合结晶的条件。据相关数据显示,目前的高通量蛋白质结晶筛选的成功率仅为15.6%,---制约了蛋白质结晶技术在结构生物学领域的应用和发展。缺乏、广谱的蛋白晶体制备技术是目前结构生物学研究中的技术瓶颈。
近期,由深圳---技术研究院喻学锋研究员课题组研发的一种蛋白质结晶筛选添加剂——人工晶种混悬液---了技术桎梏。新法的应用,能够让蛋白质晶体的结晶更简便,更科学,更完整。
重组蛋白技术在蛋白质结晶、蛋白质、蛋白质相互作用及结构蛋白质组学研究中具有非常重要的作用。当前对重组蛋白的纯化,目前常采用固定化金属离子亲和色谱(imac)技术,即通过imac材料上的金属离子与组氨酸标签之间的螯合作用实现带组氨酸标签的重组蛋白的纯化,但是由于imac材料上金属离子暴露在材料表面,任何能与金属离子产生螯合作用的蛋白质均获在imac上,如表面富含组氨酸。
本实用新型公开了一种新型的蛋白质结晶板,包括顶部结晶板和下端结晶板,所述顶部结晶板安装固定在下端结晶板的上端位置上,所述顶部结晶板的上端中间设置有阵列凹槽,通过结晶板外壳,内部储槽和滴液凹槽所组成的三孔结晶板可以---的满足特定的使用需要,三孔结晶板的结晶板外壳连接在顶部结晶板上,从而可以---的固定连接住。
获取蛋白质晶体是蛋白质三维结构解析,---生产,自组装纳米体系构建等过程中重要的步骤.例如,利用x射线衍射技术对蛋白质进行三维结构解析时,首先需要通过结晶条件筛选,获得较高的蛋白质晶体。
尽管近些年来在蛋白质结晶的理论、方法和技术上已取得---发展,获得衍射---的蛋白质晶体仍然是利用x-射线解析蛋白质结构的一个主要瓶颈问题。这里我们发展了一种新型的蛋白质结晶方法—固液界面方法,即slim。该方法主要包括两个部分1)预先加入并干燥蛋白质母液;2)进行晶体生长的时候,直接将蛋白质溶液加入干母液中,从而产生一个固体(干母液)和液体(蛋白质溶液)的界面。该方法不仅操作简单、快速,而且降低了对蛋白质溶液浓度的要求。
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