原位杂交电话「思特进」

发布者：武汉思特进科技发展有限公司时间：2021-11-20

多彩色荧光原位杂交技术多彩色荧光原位杂交(multicolor fluorescence in situ hybridization，mfish)是在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术，它用几种不同颜色的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交，能同时检测多个靶位，各靶位在荧光显微镜下和照片上的颜色不同，呈现多种色彩，因而被称为多彩色荧光原位杂交。它克服了fish技术的局限，能同时检测多个基因，在检测遗传物质的突变和染色体上基因定位等方面得到了广泛的应用(杨明杰等1998)。

杂交液中的阳离子浓度通过静电排斥作用影响了杂交体之间的链稳定性，较高的盐浓度将增加杂交体的稳定性。大于0.4m的na离子浓度，对tm值、双链复性速率的影响不大，但随着na离子浓度的降低，将---影响tm值和双链复性速率。

有2机溶2剂---胺的作用是降低dna-dna和dna-rna等双链体的解链温度。通常dna需要在0.1~0.2m na+ 90~100℃的条件下变性，那么应用于原位杂交，样品必须在65~75℃的条件下进---时间变性，这将导致样品形态学的破坏。50%---胺的应用能将杂交温度降至30~45℃。

---葡聚糖具有很强的水合性，高浓度的---葡聚糖会使得---分子无法获得周边亲水环境，增加了探针浓度，加快杂交反应速率。

在条件都得到满足的情况下，杂交的成败就取决于保温时间。时间短了，杂交反应不完成；时间长了也无益，会引起非特异结合增多。一般杂交反应要进行20h左右。1966年britten和kohne用cot =值来计算杂交反应时间。cot 值实际上是杂交液中单链起始浓度co和反应时间t的乘积。实验表明cot =100时，杂交反应基本完成。cot=0，基本上没有杂交。例如在液相杂交中未标记的dna 400μg/ml按单股dna每微克紫外吸收值为0.024计算，总的吸收值为 9.6，如果反应时间为21h，那么对于未标记的dna来说，cot =9.6/21 =100.8,，杂交完成了。对标记dn a浓度为0.1μg/ml来说cot值为0.05，这就充分排除了标记dna的自我复性。tm值25℃时杂交zui佳，所以首先要根据公式4计算杂交体tm 值。由此式可见，通过调节盐浓度、---胺浓度和杂交温度来控制所需的严格性。

联系时请说明是在云商网上看到的此信息，谢谢！

本页网址：https://www.ynshangji.com/xw/23836726.html

声明提示：

本页信息（文字、图片等资源）由用户自行发布,若侵犯您的权益请及时联系我们，我们将迅速对信息进行核实处理。

原位杂交电话「思特进」

相关商机

推荐信息