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高架十字迷宫试验 :
epm ) 既可以建立焦躁应激的模型也是国际上-的-测量焦躁反应的方法。其原理是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐 惧心理, 形成动物的矛盾冲突来考察大鼠的焦躁状态。 epm 测试的项目中, 焦躁动物的 oe% 和 ot% 会明显降低, -抗焦躁药则使两者升高, oe + ce 反映了动物的运动活性。本研究发现模型组大鼠的 oe% 和 ot% -下降, 运动活性也降低。hd反映了动物在非保护区内的探索行为, 代表动物对陌生环境的好奇探究或因恐惧而寻求逃避, 与焦躁程度有一定相关性, 本研究中空瓶应激后的大鼠 hd行为减少; rr可用来观察药有无-作用及-强度。上述结果证实, 慢性应激后的大鼠明显处于焦躁状态, 说明慢性焦躁应激大鼠模型的制备成功, 且通过量化的标准客观反映出大鼠的焦l虑程度。
三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度x轴投影速度四、实验方法及应用
1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后-性地给予正常食料据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g,以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒每只4~5粒,直径约3~4mm。然后,同时将4只动物置于迷宫中央通往各臂的门打开。让其自由摄食、探究10min。
3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。
4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。
5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前-的训练,-2次。
6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。
因 sp 是单只大鼠进行实验且在实验中大鼠的活动空间受限,故有学者认为以上的-与实验室表现可能与大鼠的群体隔离或活动空间受限有关,进一步研究发现,在实验前群体饲养的动物当与群体隔离后也会出现攻击行为增加,血浆中 cort 增加,功能抑制等表现。大鼠活动空间受限也可引起血浆中 cort 的水平的增加,这些结果与单平台睡眠剥夺实验中见到的类似,为克服sp 中大鼠与群体分离及活动空间受限的缺点,在 sp 基础上进一步发展为多平台睡眠剥夺法。
1.2多平台睡眠剥夺法
m p法于1981年先应用在大鼠睡眠剥夺实验中,在 m p中为扩展大鼠的活动空间将台由 sp 中的 1 个增加至 7 个,仍将1只大鼠放在台间进行睡眠剥夺试验,因大鼠可以在 7个台间自由活动,故活动范围较 sp 中有明显增大。经实验比较,在m p中反映应激增强的一些指标,如上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在,甚至在大鼠-中 acth %cort 的增加及上腺重量的增加较sp的更高,提示 m p较sp有-的应激性!考虑到大鼠为群居动物,单只大鼠实验易导致与所在群体的隔离。为克服群体隔离所带来的应激反应,有学者将 m p 法进一步改良发展为改良多平台睡眠剥夺法!
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