怀柔区CS250冻存袋价格-了解更多 北京思齐生物有限公司

冻存袋的基本原理

利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。 细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%．15%的甘油或dmso，可使溶液冰点降低，加之在缓慢---条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。 采用慢冻快融的方法能较好地---细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min，当温度低于-25℃时可加速，到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。

冻存袋细胞复苏操作步骤

1.操作人员应戴防护面罩及手套，防止冷冻管可能爆裂之伤害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷冻管，检查盖子是否旋紧，由于热胀冷缩过程，此时盖子易松掉。

3.将新鲜培养基置于37℃水槽中回温，回温后喷以70酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。

4.取出冷冻管，立即放入3℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，以7o%酒精擦拭保存管外部，移入无菌操作台内。

5.取出解冻之细胞悬浮液，缓缓加入有培养基之培养容器内(稀释比例为1:10~1:15)，混合均匀，放入培养箱培养。取0.1m1解冻细胞悬浮液作存活测试。

6.解冻后是否立即去除冷冻保护剂，依细胞种类而异，一般而言，大都不需要立即去除冷冻保护剂。惟若要立即去除，则将解冻之细胞悬浮液加入含有5-10m1培养基之离心管内，离心 1000rpm，5分钟，移去上清液，加入新鲜培养基，混合均匀，放入培养箱培养。

冻存袋，可千万别这么用哈！

1.不要使用金属管夹

2.不要离心

3.不要在冻存袋上直接写字标识冻存细胞的信息

4.不要在冻存袋表面粘帖标签不使用同一冻存袋多次冻融细胞

5.dmso稀释以后才能放进冻存袋，dmso浓度不要超过10%

6.复苏细胞时建议把冻存袋放在一个保护袋中进行融化

7.不要超过冻存袋的工作体积

冻存袋使用需要注意？

1、操作冻存袋复苏，全程使用安全防护设备，建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下，请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季，请---小心。

2、冻存细胞储存过程中，冻存袋的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生，冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存袋受损。