新疆-前动物实验欢迎来电「多图」
高架十字迷宫试验 :
epm ) 既可以建立焦躁应激的模型也是国际上-的-测量焦躁反应的方法。其原理是利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐 惧心理, 形成动物的矛盾冲突来考察大鼠的焦躁状态。 epm 测试的项目中, 焦躁动物的 oe% 和 ot% 会明显降低, -抗焦躁药则使两者升高, oe + ce 反映了动物的运动活性。本研究发现模型组大鼠的 oe% 和 ot% -下降, 运动活性也降低。hd反映了动物在非保护区内的探索行为, 代表动物对陌生环境的好奇探究或因恐惧而寻求逃避, 与焦躁程度有一定相关性, 本研究中空瓶应激后的大鼠 hd行为减少; rr可用来观察药有无-作用及-强度。上述结果证实, 慢性应激后的大鼠明显处于焦躁状态, 说明慢性焦躁应激大鼠模型的制备成功, 且通过量化的标准客观反映出大鼠的焦l虑程度。
脑组织组化实验
1. 灌注固定用的针头,一般都用注射针头。灌注大鼠一般可用 10 到 12 号针头,小鼠可用 6、7 号针头,但很重要的一点是要把针头的磨钝而不是用锐利的针头。
2. 关于穿刺:灌注大鼠时要把穿刺针的插入到升主动脉内,但不宜进入升主动脉过长,在动脉内见到针头或插入约 1mm 左右即可;灌注小鼠时只要把针头插入左心室内即可,不-插入到升主动脉内。操作的要点是:,操作要迅速,剪开膈肌后,迅速沿腋前线剪开胸壁,并把胸前壁往上翻,暴露-;第二,一定要在明视野下操作,要剪开心包壁层的前壁,暴露升主动脉和肺动脉干的根部,-穿剌针能进入升主动脉;第三,穿刺之前要用适当大小的血管钳夹住心室以固定-,但不要夹得过紧,要让心腔内留有一定的间隙,然后在心尖处轻轻旋转针头插入穿刺针。也可以用小剪刀在心尖处先剪开一个小口再插入穿刺针;第四,穿刺方向要正确,从心尖部开始,从左下方斜向右上方,若遇阻力要改变方向再试,不要用力蛮插。
3. 灌注用生理盐水的量大鼠用 50ml 左右,小鼠用 10ml 左右,一般以从右心耳流出的液体清亮为标准;4% -用量约相当于老鼠体重,如 300 克的老鼠用 300ml 左右。小鼠一般用 20-30ml。灌注速度先快后慢,可持续 1-2 个钟头,也可以稍快。取脑后置脑块于 4% -内 4 度后固定 4-6 个钟头。
注意事项
1. 针头大小与动物的种类有关,t 同时针头一定要磨钝。
2. 检查灌注泵的运作情况,一定排出管子的气泡和空气,防止空气栓塞。
3. 经腹腔暴腔,先清楚升主动脉外面的脂肪组织和心外膜组织。
4. 将针头经左心室插入升主动脉颜色变白的哦,并用钳子固定。
5. 解开右心耳,同时开启灌注泵。注意,不要-揭开-的其他部位,否则有时候可能会灌注成功但是绝大部分会造成灌注不成功,尤其。
6. 将 4 度的生理盐水好已动物的发白为标准,我们实验室的大鼠约用 250ml和- (根据所取得材料而定) 依次灌入。
7. 整个过程均应将动物放在冰上,以便于-地保存目的蛋白和酶的活性。
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