G蛋白活性检测试剂盒品牌企业「武汉纽斯特」

纽斯特生物技术有限公司推出的cdc42活性检测试剂盒主要是依据单克l隆抗l体能够特-的识别cdc42-gtp结合蛋白，而不识别cdc42-gdp结合蛋白，进而简单并且快速的进行cdc42的活性检测。同时试剂盒中的cdc42-gtp单克l隆抗l体也可以进行免l疫组化实验中细胞和组织中cdc42的活性监测。每套试剂盒可以进行20次检测。

gtpases的rab家族调节真核水泡膜运输。 rab35与两个血浆

膜和内体定位，并涉及到包括t细胞受体回收，卵母细胞卵黄蛋白回收和胞质分裂在内的各种过程。 rab35调节神经元样细胞中的神经突生长，并可以-突起。

当前没有直接测定法来测量rab35 gtpases的活化。

neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒基于特定于配置的单克l隆

特-识别rab35 gtp而不识别rab rab35 gdp的抗l体。鉴于...的高度亲和力

抗原的单克l隆抗l体，可以在短时间内进行激l活测定。这个

分析提供了-的结果，并具有一致的可重复性。

这些抗rab35 gtp单克l隆抗l体也可以用于监测大鼠rab35的激l活。

1细胞和组织中的免l疫组织化学。

neweast biosciences rab35激l活检测试剂盒提供了一种简单快速的方法来监测

rab35的激l活。每个试剂盒均提供足够的量以执行20个测定。

武汉纽斯特生物科技有限公司wuhanneweastbiotechonologyco.ltd，系美国生命科学试剂供应商美国neweastbio在中国的子公司。美国neweastbio-于生命科学和生物技术领域，主要产品有小分子、elisa试剂盒、蛋白等。

悬浮细胞

1.培养细胞并根据需要用活化剂或抑制l剂-。

2.进行细胞计数，然后通过离心沉淀细胞。

3.吸出培养基，并用冰冷的pbs洗涤两次。

4.完全除去pbs洗涤液，然后向细胞沉淀中加入冰冷的1x分析/裂解缓冲液

   每1 x 107池0.5 – 1 ml。

5.通过重复移液裂解细胞。

6.将裂解物转移至适当大小的试管中，并置于冰上。

7.如果发生核裂解，则细胞裂解液可能变得非常粘稠，难以移液。如果这

   发生时，裂解液可通过27?号注射l器针头3-4次以剪切

   基因组dna。

8.通过离心10分钟在4°c下为12,000 x g清除裂解物。

9.收集上清液并将样品保存在冰上以备立即使用，或速冻并保存在-

   70°c以备将来使用。

阳性和阴性对照的体外gtpγs/ gdp蛋白质上样量

    注意：体内-细胞会激l活大约10％的可用rab35，而

    体外gtpγs蛋白负载将激l活近90％的rab35。

1.将0.5 ml每种细胞提取物等分到两个微量离心管中或使用1 μg纯化的rab35蛋白。

2.向每个试管中加入20 μl 0.5 m edta至20 mm终浓度。

3.将5 μl 100 xgtpγs至100 μm，终浓度加到一个试管中阳性对照。

4.在第二个试管中加入5 μl 100 x gdp至1 mm，终浓度阴性对照。

5.在搅拌下将试管在30°c孵育30分钟。

6.通过将试管放在冰上并添加32.5 μl 1 m mgcl2至60 mm。