河南微生物菌种去除生产厂家的行业须知「北京开碧源」
也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。种子制备包括孢子制备和菌丝体制备见图,其中(1)~(4)为孢子制备过程。保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃或较高温度下培养5~7天(或较长时间)。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子,对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基。将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、---及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28~37℃培养5~14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产菌种不产孢子,如产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶5液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源如---和氮源如玉米浆等,及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
孢子分离又可分为以下几种方法:
( 1 褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、未裂破的子实体,洗净后用75 %酒精表面灭菌2 分钟,然后连同培养基一起放入接种箱内,经熏蒸消毒12 ~ 24 小时,再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹,把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种,,后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养,可得纯菌种。
( 2 孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布,置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后,便落下孢子,形成印痕即孢子印。然后,用接种环或玻璃棒蘸取孢子,接种在平面或斜面培养基上,进行恒温培养,可得纯菌种。
( 3 孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘,直径25 厘米左右,盘内先垫衬4~6 层纱布,中央放1 副9 厘米直径的培养皿,大盖口朝下,上放小的,口向上。然后,在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架,再将带孔的玻璃钟罩盖上,顶上罩孔用棉塞塞好,用纱布包好整个孢子收集器,置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。
孢子收集器灭菌消毒后,放入无菌室或无菌箱内。然后,用小刀割取1 块4~5 厘米大小的子实体,插在收集器内的三角架顶上若无孢子收集器,也可用培养皿代替。再置于温度24 ~26 ℃下培养24 小时,培养皿中便可见到白---状物,此即为孢子。此时,可将孢子收集器再移至接种箱内,取出培养皿,盖好,并在培养皿内加入10 ~ 20 毫升的无菌水,使孢子散于本中,成为孢子悬浮液。然后,再用无菌---筒或吸管吸取孢子悬浮液,接种于试管斜面培养基上,每管注2 ~ 3 滴。置于24 ~ 26 ℃温度下培养5 ~ 7 天,培养基上便可长出白色菌落。待菌落直径有0 . 5 厘米时,选健壮的菌落,再移接于另一试管的斜面培养基上培养。当白色菌丝长满试管时,便得纯菌种。
有些微生物肥料中的微生物还可分泌植物类物质、---等,---和调节作物生长发育。例如,固氮菌等能够产生多种活性物质(生长素、环己六醇、泛酸、吡哆醇、硫胺素等),固氮菌培养物中可检测到3----;荧光假单孢菌的所有菌株均能产生赤素和类赤素物质,部分菌株还能产生---,少数菌株能合成生物素和泛酸;丛枝菌根---能-牧草植株产生细胞分裂素(ctk),改变脱落酸(aba)与赤素的比例。
微生物肥料的功效是一种综合性作用,一般不直接为农作物提供营养元素,主要起间接营养的作用,归纳起来主要有如下几方面。
微生物还能分泌产生大量的胞外多糖类物质,如荚膜多糖、肽聚糖等。研究表明,这些有益微生物产生的糖类物质,占土壤有机质的0.1%,它们能与植物根系分泌物、土壤胶体等共同作用,形成土壤团粒结构。此外,它们还参与腐殖质形成,---土壤理化性质。
许多微生物肥料能---作物品质。根瘤菌固定的氮素能输往籽粒,使得豆科作物籽粒蛋白质含量提高。此外,一些蔬菜施用某些微生物肥料之后,能增加其中的---含量,降低叶菜类作物中的含量,提高果菜类作物中的糖分含量等。
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