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反相色谱分离纯化后，怎样除去流动相产品中的tfa和---或其他杂质？

tfa是反相色谱分离中常用的添加剂。可以用冻干的办法去除，国外许多文献是这样---的。还可以试试离子交换、凝胶层析、甚至透析和超滤，其中，离子交换层析效果比较好，还可以起到浓缩样品的作用。

首先，冻干的办法应该可以几乎完全地除去tfa和---，---实验前尽量先检测一下冻干品中的残留量，只要不超过允许范围，这种办法是很简单、有效的。

其次，如果你的---的分装量不大的话(<100ug)，建议你用离子交换层析，尽量装一个小一点儿的柱子，让含盐洗脱峰的蛋白浓度达10mg/ml以上，稀释后完全符合试验要求。如果用分子筛，考虑稀释，尽量也先过一个离子交换。此外可以试试疏水层析。如果产品是碱的话，可能会形成tfa盐，这样通过上述方法就无法除去。一般可以用碱水洗，然后将产品萃取出来。或者在里面加入一定量的---，再干燥后形成---盐。

反相色谱分离后，如何快速从流动相中得到产品？

可以考虑先在低温下，减压旋蒸除去其中的有机的溶剂，然后用萃取的方法把产品萃取出来，然后再低温再旋蒸，这样，就可以不将温度升得---而得到产品。如果要直接蒸掉流动相，水泵的真空度要注意要检查气密性，否则蒸水会很慢。一般比较好的泵在60～70度即可蒸掉水，如果泵的真空度不好，可能需要80～90度才行，这样容易暴沸导致样品损失。温度太高可能引起物---性。

工业制备色谱

工业色谱又称制备色谱。利少{j组分的差速迁移而实现i.业规模混合物分离的方法它包括一个流动相(被分离的气相或液相)和一个固定相。两相在色谱柱r}，进行接触，在色谱柱l，流动相沿固定相流动，由」几混合物中各组分被固定相滞流程度不同，它们随流动相移动的速度就不同，因而可使各组分.4.相分离。根据流动相的不}.可，可分为}l相色谱与液相色谱两类。根据固定相的类型，可分为吸附色谱、分配色ih离子交换色谱、亲和色潜排i}}l色谱五类。上业色谱可分离选择性系数非常接近的组分，它适用于热敏n}物质的分离，对制备高纯物质---有效