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从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应---复苏时低温保护剂获得1:10~1:20的稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释10~20倍以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。通用细胞冻存液(无血0清)主要由培养基、dmso等组成,不含血0清,是一种---的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。
细胞复苏操作方法
2.1从液氮罐取出冻存细胞,立即放入37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中,快速融化。
2.2准备离心管,加入2倍冻存细胞体积的细胞培养基,待冻存管中细胞完全融化后,将冻存细胞悬液缓慢加入离心管中。
2.3 1200-1500rpm 5min离心,弃上清。
2.4加入适量新鲜培养基,使用移液管缓慢悬浮细胞,并将细胞转染细胞培养皿/瓶中,显微镜下观察细胞状态,放入细胞培养箱中培养。
2.5 24h后观察细胞状态,并更换新鲜细胞培养液。
细胞冻存案例:
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