重庆反相色谱柱采购来电咨询「慧德易科技」
色谱是一种分离分析手段,分离是,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的---。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于hplc的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球包括离子交换树脂、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用---2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构尽可能减少填充床以外的死体积及装填技术。即使好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
色谱柱由柱管、压帽、卡套密封环、筛板滤片、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有---的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm5~10&μm,取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序,作为参考:硅胶柱以正已烷或---、和依次冲洗,然后再以相反顺序依次冲洗,所有溶剂都必须严格脱水。能洗去残留的强极性杂质,已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、、、或依次冲洗,再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液,那么可以省略用水冲洗这一步。能洗去残留的非极性杂质,在冲洗时重复注射100~200μl---数次有助于除去强疏水性杂质。---与或的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲---数次。此外,用、和三0.1%梯度洗脱能除去蛋白质污染。
阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗,阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗,除去交换性能强的盐,然后用水、、除去吸附在固定相表面的有机物、、水依次冲洗。
保存色谱柱时应将柱内充满或,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。
在后两种情况发生时,小心拧开柱接头,用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度注意把被污染填料取净再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相与柱内相同填满色谱柱,压平,再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到---,但是很难恢复到新柱的水平。
二者实质上是不一样的东西,固相萃取柱是拿来做固相萃取用的,关键功能是过滤系统和---样品,而液相色谱柱是液相色谱上采用的,用于剖析样品的。 固相萃取柱是样品解决的过程中用的,液相色谱柱是仪器设备上的一个零配件等同于,机器不可或缺的一部分,使成分分离才进探测器检验的。 之上便是有关固相萃取柱的相关内容详细介绍,若有要求,热烈欢迎拨通站点上的服务热线!
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