ISH电话 武汉思特进

原位杂交技术可应用于什么方面

1.细胞特-mrna转录的定位　可用于基因图谱、基因表达和基因组进化的研究。

2.感6染组织中-dna/rna的检测和定位，如eb-mrna、人类乳3头状瘤-和巨细胞-dna的检测。

3.癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。

４.基因在染色体上的定位。

5.检测染色体的变化，如染色体数量异常和染色体易位等。

6.分裂间期细胞遗传学的研究，如遗传病的产前诊断和某些遗传

就dna探针和rna探针的比较，dna探针在杂交过程中会出现探针双链之间退火的可能，也更倾向于在溶液中形成大分子的探针聚合体，从而影响其渗透能力。而rna 探针的应用，将提高dna-rna杂交子的热稳定性。

tips：rna探针因其单链、高分子结合力、可适应高温杂交的特性，其检测特-和灵敏度均优于dna探针。常用的rna探针标记方法为构建质粒后进行转率合成。通过pcr扩增的方法，可以更方便地进行rna探针的制备；rna探针合成后，还需验证其对目标片段检测的灵敏度和特-。

杂交流程

杂交液的成分主要影响了-杂交的复性动力学和热稳定性。杂交液的基础成分为：denhardts溶液ficoll，bsa，pvp，异源-如鲱精3子dna/trna/竞争dna，磷酸钠，edta，sds，盐离子，-胺和-葡聚糖，以及杂交探针。不同的应用中进行杂交温度、ph、盐离子、-胺、探针浓度等条件的优化。常用的ph范围为6.5~7.5，较高的ph值有助于提高杂交的严谨性。