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色谱柱技术包括填料技术,封尾技术和装柱技术等,填料技术自不待言,填料的差异对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响,色谱填料的键合相密度的不同也会影响到填料表面硅---外露的多少,进而影响填料的选择性。封尾技术中用到的封尾试剂的差异也会对色谱柱的性质产生很大的影响,如体现在色谱填料的ph耐受范围,水相耐受范围,极性强弱等。装柱技术也没有---中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。
液相色谱仪依据样品在固定相和流动相分离过程的物理化学原理,可分为以下五种。
1、吸附色谱:
用固体吸附剂作固定相,以不同极性溶剂作流动相,依据样品中各组分在吸附剂上吸附性能的差别来实现分离。
2、分配色谱:
用载带在固相基体上的固定液作固定相,以不同极性溶质作流动相,依据样品中各组分在固定液---配性能的差别来实现分离。根据固定相和液体流动相相对极性的差别,又可分为正相分配色谱和反相分配色谱。当固定相的极性大于流动相的极性时,可称为正相分配色谱或简称正相色谱;若固定相的极性小于流动相的极性时,可称为反相分配色谱或简称反相色谱。
3、离子色谱:
用微粒离子交换剂作固定相,以具有一定ph值的缓冲溶液作流动相,依据离子型化合物中各离子组分与离子交换剂上表面带电荷基团进行可逆性离子交换能力的差别而实现分离。
4、体积排阻色谱:
用化学惰性的多孔性凝胶作固定相,按固定相对样品中各组分分子体积排阻滞作用的差别来实现分离。以水溶液作流动相的体积排阻色谱柱,称为凝胶过滤色谱;以有作流动相的体积排阻色谱法,称为凝胶渗透色谱法。
5、亲和色谱:
以在不同基体上,键合多种不同特性的配位体作固定相,用具有不同ph值的缓冲溶液作流动相,依据生物分子与基体上键联的配位体之间存在特---亲和作用能力的差别,而实现对具有生物活性的生物分子的分离。
概述
制备液相色谱英文名称 preparative liquid chromatograph,即将分析色谱的进样量增大,同时得出大量的所需物质馏分的过程,其目的是从混合物中得到纯物质。
特点
按照操作的样品量分为三种:半制备≤100mg、制备0.1-100g、-制备***100g。色谱柱直径一般大于2厘米,主要用于工业化大生产。
应用领域
科研、工业化大生产,尤其是化学、化工、制药行业的工业前处理步骤,应用十分普遍。
下面给大家介绍几条选择液相色谱仪的方法仅供大家参考。液相色谱仪有输液泵、自动进样器、柱温箱、检测器、柱温箱等。判断液相色谱仪的指标有噪音,漂移,很小检测浓度,定性定量重复性等。
1、液相色谱仪噪音是指由液相色谱仪的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他液相色谱仪非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动。噪音的大小直接关系到液相色谱仪检测器的检测灵敏度,噪音越大,检测的灵敏度就越低。
2、液相色谱仪检测器很小检测浓度(很小检测限)是反映液相色谱仪检测器灵敏度的重要参数。cl=2×nd×c/h(cl:液相色谱仪很小检测浓度nd:噪音c:液相色谱仪样品浓度很小检测浓度h:样品峰高)。
3、液相色谱仪检测器漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离液相色谱仪基线---的距离,通常用来衡量液相色谱仪稳定快慢。高的品质的液相色谱仪能在较短的时间内达到稳定,从而在一定程度上提高了液相色谱仪分析效率。
4、液相色谱仪定性定量重复性定性定量重复性主要是考核液相色谱仪稳定性的指标,这对于分析液相色谱仪样品来说是非常重要的。好的液相色谱仪其稳定性应该是十分好的,这就要求多次液相色谱仪进样保留时间及含量的一致性,这样做出来的液相色谱仪检测结果才能使人信服。
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