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液相色谱柱的再生

因为，色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说是柱效的下降。

1.反向柱的再生：

2.正相柱的再生：

3.离子交换柱的再生：

长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。

液相色谱柱注意事项

色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。 

　避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

　应逐渐改变溶剂的组成，---是反相色谱中，不应直接从改变为全部是水，反之亦然。

　一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

　选择使用适宜的流动相尤其是ph，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

　避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

　经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。

液相色谱柱作用

柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱5~30mm，可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料，只能在ph2~9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，---是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时也可补加填料使柱效恢复。

每次工作完后，---洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ods柱宜用冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素氟、氯、的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。装在hplc仪上柱子如不经常使用，应每隔4~5天开机冲洗15分钟。

液相色谱柱优势

硅胶的化学稳定性较差，仅能在ph=2~8的环境下工作。但是，在很多场合下，需要使用的ph条件。为此，人们曾大力发展高分子微球、氧化铝、氧化---等化学稳定性---的基质材料。但是，很难有一种材料能地满足液相色谱基质的要求。例如，高分子微球在中会发生一些溶胀，因此难以应用于以含的流动相进行梯度淋洗的场合；氧化铝和氧化---与硅胶相比，虽然化学稳定性较好，但其表面修饰与键合比较困难。因此，化学稳定性好的碳材料便很自然地被考虑作为色谱填料的基质。

碳材料有的化学稳定性，可耐受宽达ph=1~14的环境；耐高温，石墨化碳可耐3000℃以上的高温而不受破坏；经适当加工的碳材料可具有---的机械强度，具有优良的导电性、导热性及电磁屏蔽特性。更为难能可贵的是，多孔性碳材料以其结构的特点而具有---的吸附性及选择性。正是碳材料的这些特性，使人们期待它在色谱领域中能有特殊的用途。