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液相色谱liquid chromatography,lc是一种色谱技术,用于分离和分析溶液中混合物的化学成分,以确定是否存在或不存在特定成分,如果存在,则存在多少。我们中的许多人会从上学开始就熟悉平面lc的形式,在滤纸上打上黑色墨水标记,将一端浸入水中,然后观察墨水中的成分颜色是否分开。但是,分析应用中使用的大多数lc均基于柱色谱法,这将是本文的重点。顾名思义,液相色谱high performance liquid chromatography,hplc是使用高色谱分辨率进行分离的高的性能分析。分离的组分也可以在检测后使用馏分收集器分离,作为纯化的手段。hplc有多种不同的配置,可用于分离分子量从半挥发性小分子到几万千道尔顿的大蛋白生物分子的溶解组分。液相色谱法是一种非常流行的分析技术,广泛用于环境监控,农业领域。
1、进样系统进样系统分为手动进样阀和自动进样器。
2、输液系统输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵。对液相色谱分析来说,输液泵的流量稳定性更为重要,这是因为流速的变化会引起溶质的保留值的变化,而保留值是色谱定性的主要依据之一。因此,恒流泵的应用更广泛。
输液泵按工作方式分为气动泵和机械泵两大类。机械泵中又有螺旋传动注射泵、单活塞往复泵、双活塞往复泵和往复式隔膜泵。
3、分离系统分离系统包括色谱柱、保护柱以及柱温箱。
色谱柱:色谱柱是样品分离的---。色谱柱在使用前必须仔细阅读说明书,了解色谱柱使用的ph值范围、溶剂耐受范围、压力范围和维护方法等事项。色谱柱使用完后,需及时对色谱柱进行冲洗。冲洗完成后,应该将色谱柱从仪器上拆下来,两端用厂家配的堵头密封后,保存在色谱柱盒里。
保护柱:保护柱的作用主要是防止吸附性强的杂质对色谱柱污染,从而延长色谱柱的寿命。针对不同型号的色谱柱,应选择相对应填料的保护柱。应注意柱芯也是有寿命的,应该定期进行更换。
柱温箱:色谱柱温度变化,可能会导致保留时间的变化。为了避免这个问题,建议使用柱温箱。
4、检测系统液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。
5、数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。
采用电子压力脉动抑制技术.取代了传统的机械缓冲器,有效的控制了流速的波动,使仪器的---性得到了进一步的提升,同时使系统的死体积降到了较小.
采用---直流伺服电机及编码器.给电子压力脉动抑制技术的实施提供了有力的保障,同时泵部件的体积和重量比步进电机减小很多,噪音基本得到消除.
输液结极模式为串联式.较并联式结很少两只单向阀,进而由单向阀故障所导致的系统故障率会减少50%,至于并联式结极交替供液所产生的流速波动同样需进行进一步的抑制,就并联式结极本身来讲并不能去除流速的波动. 不同的色谱柱阻尼---动相的输送效率问题(单向阀的启闭、流动相的压缩性等)由相应的参数进行自动调整补偿,以---色谱系统流速的稳定性. 可扩展功能枀为丰富,如四元高压梯度、四元低压梯度等.
流速范围可通过更换泵头及相应的系统参数进行调整.即可由10ml的分枂型轻松转换为50ml的半自备型.
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