胶回收试剂盒询问报价「多图」

如何确认rna的

实时荧光定量pcr技术是通过测定rna的转录水平来评估基因的活力。rna样本提取的直接影响基因表达分析。影响rna品质的因素有以下三种：rna浓度、rna纯度和rna完整性。

检测rna浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种：

紫外分光光度计法：

测量260nm吸收值计算rna浓度，测量260nm/280nm吸收值的比值，用于评估rna纯度。需要注意的是：在检测-物质时应该在固定的ph溶液中进行。

260nm/280nm的比值范围在 1.9~2.1 之间。＜1.9，说明有蛋白质残留；＞2.1，说明rna可能发生降解。

琼脂糖凝胶电泳：

完整的rna通常有三条带，zui亮的是28s条带，其次是18s条带，zui淡的是5s条带部分试剂盒提取时会过滤掉5s条带。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28s和18s的比值。该方法主要用于检测rna的纯度和完整性。

如果28s和18s条带明亮、清晰、条带锐利，28s的亮度在18s条带的两倍以上，我们认为rna的zui好。

若rna条带出现弥散，原因可能：rna被-酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。

信使rnamrna早先发现于1960年，在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成，具有以下特点。 

1.含量低，占细胞总rna的1%~5%。

2.种类多，可达105种。不同基因表达不同的mrna。

 3.寿命短，不同mrna指导合成不同的蛋白质，完成使命后即被降解。---mrna的平均半衰期约为1.5分钟。脊椎动物mrna的半衰期差异---，平均约为3小时。

4.长度差异大哺乳动物mrna长度为5×102~1×105nt原核生物与真核生物的mrna虽然在结构上有差异，但功能一样，都是指导蛋白质合成的模板。

rna试剂盒注意事项

所有相关器皿耗材都应为rnase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中rna酶污染样品。

rna在水溶液中od值可能在1.5-1.9之间，但这并不表示rna不纯，需电泳检测。

使用时一定要根据自己的实验需要购买专1用提取试剂盒， 如果不是专1用试剂盒，或许能提出rna，但不能---其以及完整性，会影响rt-pcr、northern blot、dot blot、real time rt pcr、芯片分析、polya 筛选、体外翻译、rnase 保护分析、分子克1隆等后续实验的结果。

当前提取效果好的是rna提取试剂盒，但其售价较高，单次实验费用花费太大，对精度要求不高的实验没有---购买，当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题如果碰上国内无货的时候，要从国外发货，会等很长一段时间。普通的提取实验用国产的试剂盒就---，价格不高，基本上各地均有现货，如天根国内生产的试剂盒中销售面比较广的一种等，其价格比进口试剂盒要便宜许多，且效果还---，还可以

与dna不同，rna一般为单链长分子，不形成双螺旋结构，但是很多rna也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。

rna的碱基配对规则基本和dna相同，不过除了a-u、g-c配对外，g-u也可以配对。

在细胞中，根据结构功能的不同，rna主要分三类，即trna转运rna，rrna核糖体rna，mrna信使rna。mrna是合成蛋白质的模板，内容按照细胞核中的dna所转录；trna是mrna上碱基序列即遗传密码子的识别者和---酸的转运者；rrna是组成核糖体的组分，是蛋白质合成的工作场所。