原位杂交技术电话「思特进」

原位杂交中探针的选择

dna探针、rna探针和寡核苷酸探针均能通过不同的酶促分子反应进行标记。寡核苷酸探针的长度较短，因此避免了探针内部退火的问题，在杂交时的渗透能力也---，探针与靶标的接触这是影响原位杂交是否成功的重要因素之一。dna探针、rna探针在合成时需要控制探针片段长度，通常300-1000bp左右，能覆盖到较长片段的靶-序列，增加检测的灵敏度。

杂交流程

杂交液的成分主要影响了-杂交的复性动力学和热稳定性。杂交液的基础成分为：denhardts溶液ficoll，bsa，pvp，异源-如鲱精3子dna/trna/竞争dna，磷酸钠，edta，sds，盐离子，---胺和---葡聚糖，以及杂交探针。不同的应用中进行杂交温度、ph、盐离子、---胺、探针浓度等条件的优化。常用的ph范围为6.5~7.5，较高的ph值有助于提高杂交的严谨性。

原位杂交组织或细胞化学技术简称原位杂交in situ hybridization, ish是应用已知碱基顺序并带有标记物的-探针与组织细胞内待测的-，按碱基互补配对原则进行特---结合，形成杂交体，然后用与标记物相应的检测系统，通过组织化学或免3疫组织化学方法在-原有位置进行细胞内定位、定性和定量研究。为分子水平研究细胞内基因表达及有关细胞5因子的调控提供了有效的工具。可视为组织化学与免3疫组织化学的重大突破。

原位杂交不需要从组织中提取-，对于组织中含量极低的靶序列有---的敏感性，并可完整地保护组织和细胞的形态，更能准确地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。