果实RNA提取 友名生物技术

rna-检测试剂盒用于定性检测和分析rna-和rna分子，-适合检测-等此类-。

组分1. conviflex? rt-taq mix的-包含：mulv逆转录酶、taq聚合酶及dntp。

其中mulv逆转录酶，来自小鼠白血1病-m-mulv并经过基因修饰。

这里的taq聚合酶另-热启动功能。

此taq酶在室温下，活性被抗1体所抑制，当温度达到70°c以上时，才会被完全激1活。

在70°c 以下时，由于taq酶没有完全活化，因此实验不会产生非特-pcr产物和引物二聚体。热启动taq酶的使用可使pcr具有更高的特-和灵敏度。

用-沉淀dna时为什么一定要加naac或nacl

　　在ph为8左右的溶液中，dna分子是带负电荷的，加一定浓度的naac或nacl，使na+中和dna分子上的负电荷， 减少dna分子之间的同性电荷相斥力，易于互相聚合而形成dna钠盐沉淀，当加入的盐溶液浓度太低时， 只有部分dna形成dna钠盐而聚合，这样就造成dna沉淀不完全，当加入的盐溶液浓度太高时， 其效果也不好。在沉淀的dna中，由于过多的盐杂质存在，影响dna的酶切等反应，必须要进行洗涤或重沉淀。

　　加核糖-酶降解核糖-后，为什么再要用sds与kac来处理?

　　加进去的rnase本身是一种蛋白质，为了纯化dna，又必须去除之，加sds可使它们成为sds-蛋白复合物沉淀，再加kac使这些复合物转变为溶解度更小的钾盐形式的sds-蛋白质复合物，使沉淀完全。也可用饱和酚、*抽提再沉淀，去除rnase。在溶液中，有人以kac代替naac，也可以收到较好效果。

　　在基因操作实验中，磷酸盐缓冲系统(pka=7.2)和硼酸系统(pka=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围(ph)，可作dna的保存液，但在转化实验时，磷酸根离子的种类及数量将与ca2+产生ca3(po4)2沉淀，在dna反应时，不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同，有的要求高离子浓度，有的则要求低盐浓度，采用tris-hcl(pka=8.0)的缓冲系统，由于缓冲液是trish+/tris，不存在金属离子的干扰作用，故在提取或保存dna时，大都采用tris-hcl系统，而te缓冲液中的edta更能稳定。

--提取就像针尖上跳舞

检验的首要一步是--提取，这也是zui危险的一步，需要在专门的生物安全二级实验室里进行。检测人员要在清洁区穿戴两套防护服、两副乳胶手套，戴护目镜，穿靴套，前后穿过6道门，才能到达-实验区，--提取就像是“针尖上的舞蹈”。“每次脱下防护服，衣服都湿透了。在2—4个小时的--提取实验过程中，一般都会安排两人一组进行检验，既是规定要求，也是防止工作人员在密闭的负压实验空间里出现意外。