CS250冻存袋价格优惠报价 思齐生物技术有限公司
生长---之培养细胞、新鲜培养基、dmso、无菌塑料冷冻保存管(nalgene 5000-0020)、等速降温机
(1)传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->;-20℃30分钟--->;-8o℃16~18小时(或隔夜)--->;液氮槽长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成细胞大量消失,亦可跳过此步骤直接放入-8o℃冰箱中。
(2程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至-8o℃以下) -120℃,再放在液氮槽长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
属于医院器械领域,涉及一种适合细胞回输用的细胞冻存袋,即生物样品存储袋,包括:一存储袋袋体和与其逐一并排排列的2~6个第二存储袋袋体;一和第二存储袋袋体之间,以及各个第二存储袋袋体之间设置袋体间连接管路;一存储袋袋体上沿设置一输入口并通过该输入口与连接管的一端连接,生物样品经由连接管并通过输入口进入一存储袋袋体;一存储袋袋体上沿设置一取样口,各个第二存储袋袋体上沿设置第二取样口,一取样口和第二取样口用于将存储在袋体内的生物样品取出.本存储袋能够方便地用于对生物样品例如脐带血造血千细胞,血浆等处置,存储,冷冻,复苏以及直接给---回输生物样品---是造血细胞.
本发明的装置由细胞冻存袋;细胞冻存盒,细胞架组成,细胞冻存袋置于细胞架上,细胞架置于细胞冻存盒内.批量冻存细胞的方法:将细胞悬液装入细胞冻存袋中置于细胞架上,再将细胞架放入细胞冻存盒内;将细胞冻存盒投入液氮罐或-7o°c以下冷冻设备冷冻24小时,将细胞冻存袋取出投入液氮中或-70ci以下冷冻设备长期冻存,当需解冻细胞时,拉出细胞冻存袋放入38c-39c℃ 的温水中解冻当凝固物都融化为液体后移入无菌操作台,按无菌操作程序操作将细胞冻存袋中的细胞悬液分装入离心管中离心,弃上清液,按常规解冻细胞来操作.本发明的细胞冻存袋冻存细胞体积达50-200ml,整套装置直接投入液氮中或放入-70°c以下冷冻设备.
1.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
2.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。
3.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是dmso的浓度,从如果你加培养基的太少,那么dmso的浓度就会比较大,就会影响 细胞生长,从以前的资料来看,dmso的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是 10%dmso的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
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