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在选用支原体pcr法检测来替代药典方法时，需要考虑如下两个方面：

首先一步是要使用符合欧洲药典要求，经过全方面验证的支原体检测试剂盒，第二部是自我验证，即确认所用的样本基质对于该试剂盒方法是合适的，并且操作过程是正确的。小规模的室内验证通常需要采用三个不同批次的试剂盒，然后加入10cfu的标准品，做复孔通常是8个复孔，并且至少选择3个支原体物种进行验证。

有的支原体标准品厂家会提供cfu与基因拷贝数的比值，以方便二者的换算。因为10cfu只能确定pcr能够达到的检测限在10cfu以下，但无法具体确定灵敏度的数值。带dna拷贝数标定的基因组dna标准品则可进一步确定检测限的数值。

总之，pcr方法很有用，但需要避免假阴性，验证时应使用阳性对照、阴性对照、无模板对照和内控对照，以---pcr反应正常，以及支原体少量存在时确实能检出来，支原体不存在时也---是结果阴性，从而使得pcr方法在工业应用时能---zui终结果的---。

rna---检测试剂盒产品特点：

1. ---为逆转录酶和taq酶的预混液，将rna逆转录与qpcr扩增两个过程合并，一步完成，减少移液次数、避免交叉污染、操作简单，节约时间。

2. taq酶具有70°c热启动功能，---提高试剂盒的特---和敏感度。

3. 主要组分为---，4℃保存，储存运输方便，性能稳定。

武汉友名生物(u-mebiotech)技术有限公司成立于2009年5月18日。公司致力于为广大科研---提供品质的生命科学产品和、有效的技术服务。公司对所有岗位员工都经过了严格的培训，对所销售的产品及其使用都比较熟悉。同时，在公司内部定期开展自我提高学习培训，由各岗位员工对所销售的产品进行系统培训学习，并进行严格的考核。这都为公司的化服务提供了有力保障！公司目前主要从事分子生物学，蛋白质研究、细胞学研究，ngs等相关产品的销售及技术服务，同时也开展生物化学原料的合成，实验技术服务。

为什么用无水---沉淀dna

　　用无水---沉淀dna，这是实验中较常用的沉淀dna的方法。---的优点是可以任意比和水相混溶， ---与-不会起任何化学反应，对dna很安全，因此是理想的沉淀剂。

　　dna溶液是dna以水合状态稳定存在，当加入---时，---会夺去dna周围的水分子，使dna失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水---与dna相混合，其---的zui终含量占67%左右。 因而也可改用95%---来替代无水---(因为无水---的价格远远比95%---昂贵)。

　　但是加95%的---使总体积增大，而dna在溶液中有一定程度的溶解，因而dna损失也增大， 尤其用多次---沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀dna时可用95%---代替无水乙酵， 后面的沉淀步骤要使用无水---。也可以用0.6倍体积的---1醇选择性沉淀dna。一般在室温下放置15-30分钟即可。