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dna连接酶的性质

大肠杆1菌的dna连接酶是一条分子量为75ku的多肽链。对胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶与nad(而不是atp)反应形成酶-amp中间物，但不能继续将amp转移到dna上促进磷酸二酯键的形成。dna连接酶在大肠杆1菌细胞中约有300个分子，和dna聚合酶ⅰ的分子数相近，这也是比较合理的现象。因为dna连接酶的主要功能就是在dna聚合酶ⅰ催化聚合，填满双链dna上的单链间隙后封闭dna双链上的缺口。这在dna copy、修复和重组中起着重要的作用，连接酶有缺陷的突变株不能进行dna copy、修复和重组。

碱性磷酸酶

人体在怀孕，以及骨骼成长中遭受某种类型损伤后会将碱性磷酸酶释放进血流。碱性磷酸酶是一种由肝1脏产生的蛋白质并可以在-体器1官中发现它。在儿童和青少年的骨骼成长过程中，骨头中的磷酸酶数量相对较高。医生能通过血检了解碱性磷酸酶，如果水平过高就说明存在一些健康问题。然而，碱性磷酸酶只是帮助医生找出潜在原因的其中一个指数。

dna copy的引发

所有dna的 copy都是从固定起始点开始的，而目前已知的dna聚合酶都只能延长已存在的dna链，而不能从头合成dna链，那么一个新dna的 copy是怎样开始的呢？研究发现，dna copy时，往往先由引发酶在dna模板上合成一段rna引物，再由dna聚合酶从rna引物 3端开始合成新的dna链。对于前导链来说，这一引发过程比较简单，只要有一段rna引物，dna聚合酶就能以此为起点一直合成下去。但对于滞后链来说，引发过程就十分复杂，需要多种蛋白质和酶的协同作用，还牵涉冈崎片段的形成和连接。

制备互补dna，往往需要先分离从目的基因转录来的mrna.如果该基因编码的蛋白质是细胞中的主要蛋白质，则此基因的产物是总mrna的主要组成部分 。就胰岛b细胞而论，此细胞含有高水平---前体mrna，后者有时可以沉淀正在翻译的mrna的核糖---白体，如果用特异结合所表达的蛋白质(抗原)，则可从沉淀的核糖体中分离出---特异的mrna，一般特异mrna只是细胞总mrna中的次要成分。在这种情况下，不得不以密度梯度离心，按分子量大小把总mrna分开，然后把分离开的mrna直接用于试管中表达蛋白质(用家兔网织细胞的溶胞产物或小麦胚芽提取物作为翻译系统的---物)再用沉淀或聚---凝胶电泳从许多表达的蛋白中测定出目的蛋白，从而确定表达该蛋白的特异mrna。