天津液相色谱仪费用价格合理「-通恒」

如何用制备色谱柱制备低含量的杂质？

制备色谱柱为zorbaxsb-c18 9.4*250mm及gilson馏分收集器，色谱仪为agilent1100或lc-6a。想用其制备面积归一化法含量为0.05%左右的杂质，初步提纯后用高分辨的lc-ms进行定性分析。如何设定色谱条件，如，流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩，要求将95%以上的主峰切除。

主峰后有二个杂质靠得很近。

答：

1.制备用的流动相尽量等级高一点，否则流动相中的杂质会影响lc-ms分析。

2.使用馏分收集器时，---体积一定要计算准确，检测器的响应时间设到很小，否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比，如果4.6mm分析柱流速为1ml/min，9.4mm制备柱用1*9.4/4.62,大约为4ml/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg，理论计算0.05%的杂质大约只有5μg，显然浓度太低，尽量是多做几次，合并馏分然后浓缩后做lc-ms分析。

流动相

hplc中使用的流动相是液体，而在气相色谱法中则是气体。由于液体的密度和粘度较高，因此要使用泵来给流动相推动压力通过hplc色谱柱，因此液相色谱的背压通常---，比如压液相色谱。背压太高会对液相系统造成负担，因此适当的控制在合适的压力程度，有助于我们分析测试的正常运行。恒谱生的液相色谱柱、保护柱、在线过滤器等都能做到低背压，死体积小，避免对分析结果造成影响。

纸层析

纸层析，又称纸色谱，以一种特殊设计的滤纸作为固定相。滤纸中的纤维素层含有的水分作为固定相。缓冲液和其他溶剂用作流动相。分离的原理是相似相溶。纸色谱法可以分析的样品非常广。用毛细管或微量吸管将流动相中溶解的样品标记在滤纸上，然后将滤纸放入容器中，使其浸入溶剂中，于阴暗处进行层析，样品将在滤纸表面分离，然后对其形成的颜色进行识别。纸色谱可以分析碳水化合物、蛋白质、---酸、---、糖苷、---和尿液等样品中的代谢物。