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液相色谱的分离过程

同其他色谱过程一样，hplc也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。

开始样品加在柱头上，假设样品中含有3个组分，a、b和c，随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。分配系数小的组分a不易被固定相阻留，较早地流-谱柱。分配系数大的组分c在固定相上滞留时间长，较晚流-谱柱。组分b的分配系数介于a，c之间，第二个流-谱柱。若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流-谱柱，达到分离之目的。

不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。

其次，当不同组分在色谱柱中运动时，谱带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。所以分离效果则是热力学与动力学两方面的综合效益。

液相色谱系统特点　　

采用电子压力脉动抑制技术.取代了传统的机械缓冲器,有效的控制了流速的波动,使仪器的-性得到了进一步的提升,同时使系统的死体积降到了较小.　　

采用-直流伺服电机及编码器.给电子压力脉动抑制技术的实施提供了有力的保障,同时泵部件的体积和重量比步进电机减小很多,噪音基本得到消除.　　

输液结极模式为串联式.较并联式结很少两只单向阀,进而由单向阀故障所导致的系统故障率会减少50%，至于并联式结极交替供液所产生的流速波动同样需进行进一步的抑制,就并联式结极本身来讲并不能去除流速的波动.　　不同的色谱柱阻尼-动相的输送效率问题(单向阀的启闭、流动相的压缩性等)由相应的参数进行自动调整补偿,以-色谱系统流速的稳定性.　　可扩展功能枀为丰富,如四元高压梯度、四元低压梯度等.　　

流速范围可通过更换泵头及相应的系统参数进行调整.即可由10ml的分枂型轻松转换为50ml的半自备型.

什么是液相色谱?

液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 mikhails. 茨维特提出的。他先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物(树叶色素)。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料，粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品(混匀植物叶的溶剂提取物)倒入柱中，并让样品流过颗、粒床。随后加入纯溶剂。随着样品由于重力自上而-过柱子，可看到不同颜色的谱带被分开，因为有些组分比另外一些移动得快。他将这些分开的不同颜色的谱带与样品中原有的不同化合物相关联。他还根据每一种化合物对填料的化学亲和性强弱，提出了分析这些化合物的分离规律。与颗粒填料有较强亲和性的化合物移动慢，与溶剂有较强亲和性的化合物移动快。这个过程可这样描述:样品中的化合物在流动的溶剂(流动相)与固体颗粒(固定相)间的分布不一样。这样使每一种化合物以不同的速度移动，从而产生了化合物之间的分离。