HRP-山羊抗兔IGG(H+L)咨询 博特龙技术有限公司

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、---包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和hrp、biotin、fitc、au、pe、dylight、alexa fluor、cy3、cy5、 amca、tritc、texa red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有wb、ihc、elisa、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。

注意事项：

1、actin抗0体在western实验后，注意回收稀释的抗0体。回收的抗0体在进行western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗0体，包括已经使用过的稀释抗0体，4℃保存。

2、 回收后重复使用的抗0体，使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗0体。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴---手套操作。

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1、一次没用完的板子要带干燥剂放自封袋封好，随盒存放。

2、拿放板子时不要剧烈抖动，以免孔间交叉污染出现错误结果。

3、本试剂一般不会出现两个阳性，但出现两个阳性的现象不论在进口或国产试剂中都是真实存在的，一般会一个 od ---,另一个很低但却还能判为阳性，实验分析表明这种情况下以 od 高值孔为准，出现这种情况有多重原因：
(1)培养的细胞中有饲养细胞残留，
(2)抗0体本身存在变异，
(3)样品为非特异亲和纯化的抗0体或样品是腹0水，
(4)上清出现少量污染，
(5)实验操作粗放，
(6)加错试剂。

4、通用阳性对照数据并不一定完全一样，仅作为试剂有效指示。

水佐剂免0疫步骤

步骤一：用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注：使用的抗原用量为1免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg通常为10~20μg；2免0疫原性较强的灭活全---和---样颗粒每针次0.1~10μg通常为1~2μg。

步骤二：充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。

步骤三：通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠，每只小鼠100μl。备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快注射。

步骤四：第21天按同样方式加强免0疫一针。备注：每次佐剂和抗原现配现用。

步骤五、第35天采微量尾血进行elisa测定，抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内，　随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注：若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求，可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。

什么是单克0隆抗0体？

单克0隆抗0体(mab)，是针专一的抗原决定簇产生的抗0体，单克0隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年，由g.k?hler和milstein创立。主要原理是利用产生抗0体的b细胞与肿0瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗0体。

单克0隆抗0体制备的原理是什么？

要制备单克0隆抗0体需先获得能合成专一性抗0体的单克0隆b淋巴细胞，但这种b淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨0髓瘤细胞可在体外生长繁殖，应用细胞杂交技术使骨0髓瘤细胞与免0疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂0种的骨0髓瘤细胞。这种杂0种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有b淋巴细胞合成专一抗0体的特性，也有骨0髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克0隆抗0体。