MRNA切割酶欢迎来电 友名生物技术

一般是以微生物属名的第yi个字母和种名的前两个字母组成，第四个字母表示菌株品系。例如，从bacillus amylolique faciens h中提取的-性内切酶称为bam h，在同一品系-中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特-的酶，可以编成不同的号，如hindⅱ、hindⅲ，hpai、hpaⅱ，mboi、mboⅱ等。

别名：restriction endonuclease简称-酶

酶反应：-性内切酶能分裂dna分子在一限定数目的专一部位上。它能识别外源dna并将其降解。

单位定义：在指明ph与37℃，在0.05ml反应混合物中，1小时-1μg的λdna的酶量为1单位。

性状制品不含非专一的-水解酶由10单位内切酶与1μg λdna，保温16小时所得的凝胶电泳图谱的稳定性表示，这类酶主要是从原核生物中分离出来的，迄今已经从近300多种不同的微生物中分离出约4000种-酶。

dna-性内切酶酶切

影响条件：dna纯度、缓冲液、温度条件及-性内切酶本身都会影响-性内切酶的活性。大部分-性内切酶不受rna或单链dna的影响。

处理方法：当微量的污染物进入-性内切酶贮存液中时，会影响其进一步使用，因此在吸取-性内切酶时，每次都要用新的吸管头。如果采用两种-性内切酶，必须要注意分别提供各自的zui适盐浓度。若两者可用同一缓冲液，则可同时水解。若需要不同的盐浓度，则低盐浓度的-性内切酶必须首先使用，随后调节盐浓度，再用高盐浓度的-性内切酶水解。也可在第yi个酶切反应完成后，用等体积酚/氯1仿抽提，加0.1倍体积3mol/l naac和2倍体积无水-，混匀后置-70℃低温冰箱30分钟，离心、干燥并重新溶于缓冲液后进行第二个酶切反应。

　　-性内切酶对环状质粒dna产生的酶切片段数与切口数一致。因此，鉴定酶切后的片段在电泳凝胶的区带数，就可以推断切口的数目;从片段迁移率可判断酶切片段大小。用已知分子量的线状dna 为对照，通过电泳迁移率的比较，可以粗略地测出分子形状相同的未知dna的相对分子大小。

　　质粒dna的相对分子量(mr )一般在106～107 范围内，如质粒pbr的相对分子为2.8×106 ，在细胞内有三种构型：共价闭环dna，常以超螺旋形式存在;如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂，分子就能旋转而消除链的张力，这种松弛型的分子叫作开环dna;双链线状dna由于两条链的切口在同一部位被切断，不能成环，完全开放成线状，简称线性dna。如果要测定质粒dna的相对分子量，建议把质粒用单一切口的酶水解得到线性dna部分片段。三种构型的质粒dna 在电泳时的泳动速度为：共价闭环dna>;线状dna >;开环dna。

几种酶的比较及-酶

1几种酶的比较

(1)-性内切酶:作用于dna分子，切割磷酸二酯键，形成黏性末端或平末端。

(2) dna连接酶:作用于dna分子片段，连接磷酸二酯键，形成重组dna分子。

(3) dna聚合酶:作用于脱氧核苷酸，连接磷酸二酯键，形成新的dna分子。

(4)解旋酶:作用于dna分子，作用于氢键，形成dna分子的单链。

2.-酶:

(1)一种-酶通常只识别一种特定的碱基序列，但是有少数-酶却可以识别-

一种碱基序列。

(2)不同-酶也可以识别同-碱基序列;

(3)不同-酶识别的碱基序列虽然不同，但切出的末端也可能相互连接。