兔抗狗IGG(H+L)常用指南「博特龙」

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1、一次没用完的板子要带干燥剂放自封袋封好，随盒存放。

2、拿放板子时不要剧烈抖动，以免孔间交叉污染出现错误结果。

3、本试剂一般不会出现两个阳性，但出现两个阳性的现象不论在进口或国产试剂中都是真实存在的，一般会一个 od ---,另一个很低但却还能判为阳性，实验分析表明这种情况下以 od 高值孔为准，出现这种情况有多重原因：
(1)培养的细胞中有饲养细胞残留，
(2)抗0体本身存在变异，
(3)样品为非特异亲和纯化的抗0体或样品是腹0水，
(4)上清出现少量污染，
(5)实验操作粗放，
(6)加错试剂。

4、通用阳性对照数据并不一定完全一样，仅作为试剂有效指示。

选择性培养

选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用hat选择性培养基。在hat培养基中，未融合的骨0髓瘤细胞因缺乏次黄 piao呤-鸟piao呤-磷酸核糖转移酶，不能利用补救途径合成dna而死0亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄 piao呤-鸟piao呤-磷酸核糖转移酶，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死0亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄 piao呤鸟piao呤磷酸核糖转移酶，并具有骨0髓瘤细胞能无0限增殖的特性，因此能在hat培养基中存活和增殖。

单克0隆抗0体的大量制备

单克0隆抗0体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。

1、体内诱生法 取balb/c小鼠。

首先腹腔注射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克0隆抗0体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注0射器抽取腹0水，即可获得大量单克0隆抗0体。

2、体外培养法

将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克0隆抗0体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克0隆抗0体。但这种方法产生的抗0体量有限。近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，---提高了抗0体的生产量。